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志贺氏菌的活化、保存及鉴定
王娟
2025/5/16 10:38:42 青岛海博生物

一、志贺氏菌简介

  志贺氏菌(Shigella Castellani)是引起人类细菌性痢疾的一类肠道致病菌,兼性厌氧革兰氏阴性杆菌,大多数无动力,不发酵乳糖或迟缓发酵乳糖,能利用葡萄糖,一般不产气,目前主要分为四个生化群,分别是福氏志贺氏菌(Sh.flexneri)、宋内志贺氏菌(Sh.sonnei)、痢疾志贺氏菌(Sh.dysenteriae)、鲍氏志贺氏菌(Sh.boydii)。


二、志贺氏菌的活化培养和保存

  志贺氏菌对营养要求不高,易存活,常规使用的TSA/TSB、NA/NB、BHI、PCA、LB等培养基均可进行活化和培养,在36±1℃培养18-24h即可,在平板上菌落通常为无色透明状或淡黄色透明状。

  常见的甘油冷冻法、瓷珠菌种保存法、脱脂牛奶冷冻保存法、斜面保藏法、半固体保存法均可使用。使用斜面保藏法或半固体保存法在2-8℃冷藏保存通常可在一个月以上,使用低温冷冻保存法在-20℃或-70℃冷冻也可长期保存,温度越低保存期越长,超过2年建议使用-70℃以下冷冻保存。


三、志贺氏菌的生化鉴定

  志贺氏菌的生化鉴定可结合GB4789.5标准与细菌鉴定手册进行确认,也可使用生化鉴定系统。(志贺氏菌不同血清型之间生化反应存在差异,部分生化反应见注释详解)


生化反应

福氏志贺氏菌

宋内志贺氏菌

痢疾志贺氏菌

鲍氏志贺氏菌

TSI

K/A,H2S-a

K/A,H2S-

K/A,H2S-

K/A,H2S-

ONPG

-

+

-b

-c

尿素酶

-

-

-

-

赖氨酸脱羧酶

-

-

-

-

鸟氨酸脱羧酶

-

+

-

-d

水杨苷

-

-

-

-

七叶苷

-

-

-

-

靛基质

(+)e

-

-/+

-/+

甘露醇

+f

+

-

+

棉子糖g

+

+

-

-

甘油h

-

d

(+)

(+)

葡萄糖铵

-

-

-

-

柠檬酸盐

-

-

-

-

粘液酸盐

-

d

-

-

动力

-

-

-

-

  注:“+”代表阳性反应,“-”代表阴性反应,“-/+”代表多数阴性,“(+)”代表迟缓阳性,d表示有不同的生化型(即阴性或阳性反应菌株都有可能遇到)

  注a:除个别的福氏志贺氏菌能少量产气,其他志贺氏菌均不产气;

  注b:在GB4789.4标准中描述痢疾志贺氏菌1型ONPG反应为阳性,在《常见细菌系统鉴定手册》中描述为“d”;

  注c:个别的鲍氏志贺氏菌ONPG反应为阳性;

  注d:个别的鲍氏志贺氏菌鸟氨酸脱羧酶为阳性;

  注e:在GB4789.4标准中描述福氏志贺氏菌的靛基质反应为迟缓阳性,而在《常见细菌系统鉴定手册》中描述为“d”,在实际检验中遇到靛基质反应阴性的菌株可能居多一些;

  注f:个别的福氏志贺氏菌甘露醇反应为阴性;

  注g:部分志贺氏菌分解棉子糖可能较慢,通常需连续观察1-3天;

  注h:志贺氏菌分解甘油较慢,有时需连续观察3-7d甚至更长时间。


注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。

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