一、酚红基本性质

  酚红（Phenol red）是一种三苯甲烷型有机化合物，化学式为C₁₉H₁₄O₅S，分子量354.38，常温下为深红色结晶粉末。

1、溶解性

  可溶于乙醇、氢氧化钠及碳酸钠溶液，微溶于水，不溶于三氯甲烷和乙醚。

2、酸碱指示特性

  作为酸碱指示剂，其变色范围为pH 6.4-8.2。

二、酚红主要应用领域

1、微生物培养与检测

  在培养基中作为pH指示剂，用于监测微生物代谢活动。例如尿素分解菌产氨导致环境碱化时，酚红会从黄色渐变为红色或橙色。

2、细胞培养

  指示培养基pH状态：中性呈红色，酸性变黄（可能存在细菌污染），碱性呈紫色（需调整CO2浓度）。

三、培养基常用灭菌方法

  常用的灭菌方法有湿热灭菌法、干热灭菌法、过滤除菌法、化学灭菌法和辐射灭菌法。其中过滤除菌法通过0.22 μm滤膜截留微生物，操作具有操作快速、不破坏热敏物质、保持液体热敏成分活性的优点，常用于抗生素溶液、液体培养基及血清等热敏液体的灭菌。辐射灭菌利用紫外线和γ射线破坏微生物核酸结构，可大规模连续操作且无需加热，灭菌效果彻底多用于食品和工业领域。

四、含酚红产品灭菌方法

  含酚红培养基的灭菌方法需根据其成分特性（如热敏性物质的存在）选择合适的方式，选择高压蒸汽灭菌、过滤灭菌或辐照灭菌。灭菌后需结合酚红颜色变化及培养基透明度、pH值等指标综合验证灭菌效果。

五、试验方法

  配制酚红母液，分别溶解于500 mL DPBS溶液中，配制酚红溶液，使其终浓度为10 mg/L，15 mg/L，20 mg/L，25 mg/L，2k Gy辐照灭菌（模拟培养基灭菌过程），观察酚红溶液状态，结果如图1。

图1 酚红溶液辐照灭菌结果

  图中溶液从左到右分别为①辐照后25 mg/L酚红溶液、②辐照后20 mg/L酚红溶液、③辐照后15 mg/L酚红溶液、④辐照后DPBS溶液对照、⑤未辐照10 mg/L酚红溶液

六、试验结果

  由图中④可发现，辐照不会影响DPBS溶液的状态，溶液仍呈无色、澄清透明。由图中①、②、③与⑤对比可发现，辐照会使酚红溶液出现变色，未辐照的酚红溶液呈深红色，溶液澄清透明；辐照过后的酚红溶液变为棕褐色，溶液澄清透明。由图中①、②、③对比可知，酚红溶液的变色程度与酚红添加量呈正相关，呈现由深到浅的棕褐色。

  根据试验结果可知，在辐照过后，不同浓度的酚红溶液均出现了变色，查阅资料得知，酚红在辐照过后变色主要有以下几个原因：

1、直接破坏：高能射线破坏化学键

  （1）靶向苯环结构，辐射的高能量可直接打断苯环的共轭双键，破坏其电子离域系统，导致显色能力丧失。

  （2）脱磺酸化反应，磺酸基团可能被辐射破坏，生成硫酸盐碎片降低分子稳定性。

2、间接破坏：自由基氧化

  （1）自由基生成，辐射作用于水分子时，产生羟基自由基、超氧自由基等活性氧成分。

  （2）自由基攻击酚红分子中的醌式双键和苯环，引发氧化反应，导致结构降解；降解产物可能为无色或黄色化合物。

七、总结

  辐照会引起酚红溶液变色，进而影响其作为酸碱指示剂的功能，同时辐照还会产生邻苯醌等物质，可能对细菌和细胞培养产生不利影响。因此含酚红的液体培养基在灭菌时可选择添加对应的保护剂；或选择其他灭菌方式，如过滤除菌，避免酚红分子结构遭到破坏。

八、产品展示

  我司生产的含酚红产品如下：

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