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【成分】
MEM,F-14粉
10.58g
碳酸氢钠
1.0g
MEM氨基酸,50x
10.0ml
MEM非必需氨基酸100X
10.0ml
丙酮酸钠(1g/100ml)
11.0ml
MOPS缓冲粉
6.28g
葡萄糖
2.00g
溶液A
10.0ml
生物素
0.1mg
对氨基苯甲酸
1.0mg
【制法】
将上列各成分溶于800ml双蒸水中,用5NNaOH调整至pH7.2,再加双蒸水至1000ml。用0.22μ滤膜过滤除菌,贮存于-20℃处,用前每升培养液加2.5ml液B。
【用途】
用于利什曼原虫前鞭毛体的连续培养。培养效力和REI培养基相同,培养至第6天原虫数可达3x107/ml。此外,MEM的单种成分可从GIBCO购买,故可用于利什曼原虫的营养试验。
溶液A配制:
将前4种成分溶解于91ml双蒸水中,后3种成分先溶于1ml95%ETOH中，然后加到前4种成分混合液中，加液时需快速搅拌。
次黄嘌呤
150mg
抗坏血酸
2mg
维生素B12
2mg
牛白蛋白IV-游离脂肪酸
150mg
双蒸水
91ml
硫代酸
4mg
维生素K3
4mg
维生素A1醋酸盐
4mg
溶液B配制:
将250mg氯化血红素和500mg叶酸溶于50ml0.05NNaOH液中,加双蒸水至100mI,用1NHCI调pH至8.0,121℃灭菌15分钟,贮存于-20℃中。
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