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杨氏培养基
2025/6/26 15:11:26 现代微生物培养基和试剂手册

【原理】

  该基除兔血外,还添加了蛋白胨和葡萄糖等营养成分。葡萄糖是杜氏利什曼原虫前鞭毛体生长的重要能源,是经易化扩散机制进入虫体内,并通过糖酵解及磷酸葡萄糖支路代谢。


【成分】

  1.豆汤琼脂液:

黄豆
100g
蛋白胨
50g
氯化钠
5g
琼脂
40g
葡萄糖
20g
双蒸水
1000ml

  2.脱纤维兔血(制备同N.N.N培养基)


【制法】

  (1)豆汤制作:将大豆浸泡1214小时:期间更换几次水,去除豆皮,洗净后,加水1000ml121℃灭菌30分钟,取出用纱布加滤纸分别过滤,并用蒸馏水补足1000ml

  (2)立即加入蛋白胨、氯化钠溶解后调至pH7.27.4。再加入琼脂,溶解后121℃灭菌15分钟,保存备用;

  (3)用时将上述混合液融化后,取出若干ml,加入2%量的葡萄糖,加热使其充分溶解;

  (4)待溶液冷至70~80℃时,加入等量的脱纤维免血,充分混匀(勿使起泡)后,注入4ml于小平皿中,盖上皿盖,置冰箱备用;

  (5)为防止杂菌生长,每毫升免血中可加青霉素500u


【用途】

  用于利什曼原虫前鞭毛体培养,可将患者骨穿刺液注入培养基内,置22~25℃温箱中培养,第5天可长出鞭毛体。以后培养基上发现的汗珠状小滴变为乳白色时,即为完好发育的证明。


【注意事项】

  1.在加脱纤维免血充分混匀时,勿使其起泡。

  2.为防止杂菌生长,可在免血中加青霉素(每ml500u)
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