【原理】
该基除兔血外,还添加了蛋白胨和葡萄糖等营养成分。葡萄糖是杜氏利什曼原虫前鞭毛体生长的重要能源,是经易化扩散机制进入虫体内,并通过糖酵解及磷酸葡萄糖支路代谢。
【成分】
1.豆汤琼脂液:
黄豆
100g
蛋白胨
50g
氯化钠
5g
琼脂
40g
葡萄糖
20g
双蒸水
1000ml
2.脱纤维兔血(制备同N.N.N培养基)。
【制法】
(1)豆汤制作:将大豆浸泡12~14小时:期间更换几次水,去除豆皮,洗净后,加水1000ml,121℃灭菌30分钟,取出用纱布加滤纸分别过滤,并用蒸馏水补足1000ml;
(2)立即加入蛋白胨、氯化钠溶解后调至pH7.2~7.4。再加入琼脂,溶解后121℃灭菌15分钟,保存备用;
(3)用时将上述混合液融化后,取出若干ml,加入2%量的葡萄糖,加热使其充分溶解;
(4)待溶液冷至70~80℃时,加入等量的脱纤维免血,充分混匀(勿使起泡)后,注入4ml于小平皿中,盖上皿盖,置冰箱备用;
(5)为防止杂菌生长,每毫升免血中可加青霉素500u。
【用途】
用于利什曼原虫前鞭毛体培养,可将患者骨穿刺液注入培养基内,置22~25℃温箱中培养,第5天可长出鞭毛体。以后培养基上发现的汗珠状小滴变为乳白色时,即为完好发育的证明。
【注意事项】
1.在加脱纤维免血充分混匀时,勿使其起泡。
2.为防止杂菌生长,可在免血中加青霉素(每ml加500u)。搜产品