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10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤的原理及使用方法
郭栋秋
2026/1/22 15:25:54 青岛海博生物

一、实验原理

  用途:用于金黄色葡萄球菌增菌培养,也可用于生产线的无菌模拟灌装。

  原理:胰蛋白胨、大豆蛋白胨提供碳氮源、维生素和生长因子;较高含量的氯化钠提供较高的渗透压,抑制大多数非葡萄球菌的微生物;磷酸氢二钾是缓冲剂;丙酮酸钠促进细菌生长;葡萄糖提供碳源。


二、培养基配方(g/L)

胰蛋白胨

17.0

大豆蛋白胨

3.0

氯化钠

100.0

磷酸氢二钾

2.5

丙酮酸钠

10.0

葡萄糖

2.5

pH值7.3±0.2(25℃)


三、试验方法

  1. 称取本品135.0g,加热溶解于1000mL蒸馏水中,分装试管,121℃高压灭菌15分钟(或按相关工艺进行过滤除菌),备用。

  2. 10倍梯度稀释法制备质控菌株菌悬液,吸取适宜梯度的菌悬液接种于待测培养基(10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤)以及参比培养基(胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)HB0177)。

  3. 放置于36℃±1℃需氧培养18-24小时,观察试验结果。

  4. 吸取10μL经培养后的目标菌培养液,均匀涂布或螺旋涂布接种到Baird-Parker琼脂平板上,每支试管划1个平板,放置于36℃±1℃需氧培养24-48小时。

  5. 吸取10μL经培养后的非目标菌培养液,均匀涂布或螺旋涂布接种到胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)平板上,每支试管接种1个平板,放置于36℃±1℃需氧培养18-24小时,观察试验结果。


四、结果观察

  按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置于36℃±1℃需氧培养18-24小时。培养结果如图2。

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

参比或计数培养基

方法

质控结果

其它特征

金黄色葡萄球菌

ATCC 6538

10-100

TSA

半定量

在Baird-Parker平板>10 CFU

菌落黑色凸起,周围有一浑浊带,在其外部有透明带

大肠埃希氏菌

ATCC 25922

1000-5000

TSA

半定量

在TSA平板<100 CFU

抑制

  TSA接种量计数结果(大肠埃希氏菌TSA接种量比试管接种小10倍稀释度):

图1 质控菌株在TSA平板中的接种量

  10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤培养基:

图2 质控菌株在10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤培养基中的生长情况

  Baird-Parker平板和TSA平板的质控结果:

图3 金黄色葡萄球菌在Baird-Parker平板和大肠杆菌在TSA平板中的质控结果


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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。

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