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R2A培养基主要用于饮用水中细菌总数的计数，含有多种营养成分，其中酵母浸粉、胰蛋白胨、酸水解酪蛋白提供氮源、维生素、生长因子；葡萄糖为可发酵糖类；可溶性淀粉可以吸收菌在复苏过程产生的有害物质；丙酮酸钠可增强细菌的复苏。磷酸氢二钾为酸碱缓冲剂；硫酸镁提供二价阳离子；琼脂为凝固剂。
为探究R2A平板在培养过程中的变化，在25℃和36℃培养箱的不同位置分别放置了商品化的即用型R2A平板和自行配制并倒平板的R2A平板进行空培养，对比了不同温度、培养箱中不同位置的即用型R2A平板和自制R2A平板的变化情况。
一、试验探究
自制平板和即用型平板在36℃培养箱中存放位置如下：
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36℃培养箱 |
通风口 |
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上层 |
位置① |
即用型R2A平板 |
位置② |
即用型R2A平板 |
靠近培养箱内部 |
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自制型R2A平板 |
自制型R2A平板 |
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位置④ |
自制型R2A平板 |
位置③ |
自制型R2A平板 |
靠近培养箱门 |
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即用型R2A平板 |
即用型R2A平板 |
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下层 |
位置① |
即用型R2A平板 |
位置② |
即用型R2A平板 |
靠近培养箱内部 |
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自制型R2A平板 |
自制型R2A平板 |
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位置④ |
自制型R2A平板 |
位置③ |
自制型R2A平板 |
靠近培养箱门 |
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即用型R2A平板 |
即用型R2A平板 |
||||
注：每个位置以上下堆叠方式设置平行。
自制平板和即用型平板在25℃培养箱中存放位置如下：
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25℃培养箱 |
通风口 |
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上层 |
位置① |
即用型R2A平板 |
位置② |
即用型R2A平板 |
靠近培养箱内部 |
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自制型R2A平板 |
自制型R2A平板 |
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位置④ |
自制型R2A平板 |
位置③ |
自制型R2A平板 |
靠近培养箱门 |
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即用型R2A平板 |
即用型R2A平板 |
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下层 |
位置① |
即用型R2A平板 |
位置② |
即用型R2A平板 |
靠近培养箱内部 |
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自制型R2A平板 |
自制型R2A平板 |
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|
位置④ |
自制型R2A平板 |
位置③ |
自制型R2A平板 |
靠近培养箱门 |
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即用型R2A平板 |
即用型R2A平板 |
||||
注：每个位置以上下堆叠方式设置平行。
二、试验现象与结果
1、在36℃培养箱培养R2A的情况
在36℃上下层不同位置分别放置即用型R2A平板和自制R2A平板，上下层叠形式设置双平行，培养到第8天的结果如下：
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板层 |
类型 |
位置 |
平板状态变化 |
有无断裂 |
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36℃上层 |
即用型R2A板 |
位置①上 |
变薄约1.5 mm |
无裂 |
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位置①下 |
变薄约1 mm~2 mm |
无裂 |
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位置②上 |
变薄约1 mm~2 mm |
无裂 |
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|
位置②下 |
变薄约1 mm |
无裂 |
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|
位置③上 |
变薄约1 mm |
无裂 |
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|
位置③下 |
变薄约1 mm |
无裂 |
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|
位置④上 |
变薄约1 mm |
无裂 |
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|
位置④下 |
变薄约1 mm |
无裂 |
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自制R2A板 |
位置①上 |
变薄约3 mm |
无裂 |
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|
位置①下 |
变薄约2 mm |
无裂 |
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位置②上 |
变薄约2 mm |
无裂 |
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|
位置②下 |
变薄约2 mm |
有裂2处 |
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位置③上 |
变薄约3 mm |
有裂1处 |
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位置③下 |
变薄约2 mm |
有裂1处 |
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位置④上 |
变薄约2 mm |
有裂2处 |
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位置④下 |
变薄约2 mm |
有裂2处 |
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36℃下层 |
即用型R2A板 |
位置①上 |
变薄约1.5 mm |
无裂 |
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位置①下 |
变薄约2 mm |
无裂 |
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位置②上 |
变薄约1 mm |
无裂 |
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位置②下 |
变薄约2 mm |
无裂 |
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位置③上 |
变薄约2 mm |
无裂 |
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|
位置③下 |
变薄约2 mm |
无裂 |
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位置④上 |
变薄约1 mm |
无裂 |
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|
位置④下 |
变薄约2 mm |
无裂 |
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自制R2A板 |
位置①上 |
变薄约2 mm |
无裂 |
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位置①下 |
变薄约1 mm |
无裂 |
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位置②上 |
变薄约2 mm |
无裂 |
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位置②下 |
变薄约1.5 mm |
有裂1处 |
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位置③上 |
变薄约1 mm~2 mm |
无裂 |
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位置③下 |
变薄约2.5 mm |
有裂1处 |
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位置④上 |
变薄约2 mm |
有裂2处 |
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位置④下 |
变薄约1 mm |
有裂1处 |
培养到第8天时，36℃培养箱中，即用型R2A平板和自制R2A平板均变薄，但自制R2A平板的变薄、卷边现象更严重，甚至有部分平板出现了琼脂断裂的现象。其次越靠近门的位置，变薄、卷边现象越严重。
图1 自制R2A平板在36℃条件培养到第8天出现琼脂断裂现象
2、在25℃培养R2A的情况
在25℃上下层不同位置分别放置即用型R2A平板和自制R2A平板，上下层叠形式设置三平行，培养到第8天的结果如下：
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板层 |
类型 |
位置 |
平板状态变化 |
有无断裂 |
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25℃上层 |
即用型R2A板 |
位置①上 |
缩水，变薄约0.5 mm |
无裂 |
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位置①下 |
未观察到缩水变薄现象 |
无裂 |
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位置②上 |
缩水，变薄约0.5 mm |
无裂 |
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|
位置②下 |
未观察到缩水变薄现象 |
无裂 |
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|
位置③上 |
缩水，变薄约0.5 mm |
无裂 |
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|
位置③下 |
未观察到缩水变薄现象 |
无裂 |
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|
位置④上 |
缩水，变薄约0.5 mm |
无裂 |
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|
位置④下 |
未观察到缩水变薄现象 |
无裂 |
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|
自制R2A板 |
位置①上 |
缩水，变薄约0.5 mm~1.5 mm |
无裂 |
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|
位置①下 |
缩水，变薄约1 mm~2 mm |
无裂 |
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|
位置②上 |
缩水，变薄约1 mm |
无裂 |
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|
位置②下 |
缩水，变薄约1 mm |
无裂 |
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|
位置③上 |
缩水，变薄约1 mm |
无裂 |
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|
位置③下 |
缩水，变薄约0.5 mm~1 mm |
无裂 |
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位置④上 |
缩水，变薄约1 mm~2 mm |
无裂 |
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|
位置④下 |
缩水，变薄约1 mm |
无裂 |
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25℃下层 |
即用型R2A板 |
位置①上 |
缩水，变薄约0.5 mm |
无裂 |
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位置①下 |
未观察到缩水变薄现象 |
无裂 |
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|
位置②上 |
未观察到缩水变薄现象 |
无裂 |
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|
位置②下 |
未观察到缩水变薄现象 |
无裂 |
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|
位置③上 |
未观察到缩水变薄现象 |
无裂 |
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|
位置③下 |
未观察到缩水变薄现象 |
无裂 |
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|
位置④上 |
未观察到缩水变薄现象 |
无裂 |
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|
位置④下 |
未观察到缩水变薄现象 |
无裂 |
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自制R2A板 |
位置①上 |
缩水，变薄约0.5 mm |
无裂 |
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位置①下 |
缩水，变薄约1 mm |
无裂 |
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位置②上 |
缩水，变薄约0.5 mm |
无裂 |
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|
位置②下 |
缩水，变薄约0.5 mm |
无裂 |
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|
位置③上 |
缩水，变薄约1 mm |
无裂 |
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|
位置③下 |
缩水，变薄约1 mm |
无裂 |
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位置④上 |
缩水，变薄约2 mm |
无裂 |
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位置④下 |
缩水，变薄约1.5 mm |
无裂 |
三、试验分析与结论
R2A平板在培养箱中空培养到第8天时，36℃培养箱中，商品化的即用型R2A平板和自制的R2A平板均变薄，但自制R2A平板的变薄、缩边现象更严重，甚至有部分平板出现了琼脂断裂的现象。其次，越靠近培养箱门的位置，变薄、缩边现象越严重。25℃培养箱中，即用型R2A平板未观察到显著的变薄、缩边现象，自制R2A平板观察到有变薄现象。原因和解决方法可参考平板在培养箱中培养后，有的平板干裂严重，有的平板出水严重，是什么原因？如何解决？-常见问题解答-青岛海博生物(hopebiol.com)。总之，可在制备平板时可将R2A平板倒的更厚，使用R2A平板进行长时间培养时可选择在远离培养箱门的位置，避开通风口附近的位置，此外商品化的即用型R2A产品在长时间培养中的表现较自制平板更好，因此推荐使用商品化的即用型R2A平板。
四、相关产品
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产品货号 |
产品名称 |
用途 |
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HB0167 |
用于饮用水中细菌总数的计数 |
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HB0167-5 |
用于纯化水中菌落总数的测定 |
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HBPM0167 |
制药用水中菌落总数的测定 |
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HBPM0167-1 |
用于纯化水中菌落总数的测定 |
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HBBD0167-5-200 |
用于纯化水中菌落总数的测定 |
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|
HBPM0167-4 |
本产品主要用于水中细菌总数的测定，不含添加剂，不具有微生物鉴别和药敏鉴别的作用 |
注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。
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