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甘露醇卵黄多粘菌素琼脂(MYP)的使用原理及方法 
杨永帅
2020-3-27 10:23:24 青岛海博生物

一、实验原理:

 用于蜡样芽孢杆菌的固体平板计数。 蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素和生长因子;D—甘露醇为可发酵糖类;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;酚红为pH指示剂;卵黄含有卵磷脂,蜡样芽孢杆菌产生卵磷脂酶,在菌落周围产生沉淀环;并发酵D—甘露醇产酸使菌落显红色;多粘菌素B可抑制杂菌的生长。

 

二、试验方法:

 称取本品4.6g,加热溶解于100ml蒸馏水中,经121℃高压灭菌15分钟,待培养基冷却至50℃时,每瓶加入50%卵黄乳液5ml及多粘菌素B 10000 IU ,摇匀 ,倾入无菌平皿。临用时制备不得超过3小时。

 使用前,把制备好的平板放置室温10-20分钟。

 1、制备质控菌液

 2、将质控菌液划线或涂布于平板上。

 3、30±2℃需氧培养24-48小时,记录实验结果。

 

三、结果判定:

质控菌株

菌株编号

生长情况

其他特征

蜡样芽胞杆菌

CMCC 63303

PR>0.7

淡红色菌落,有沉淀环

蜡样芽胞杆菌

CICC 21261

PR>0.7

淡红色菌落,有沉淀环

大肠埃希氏菌

ATCC25922

-

抑制

枯草芽孢杆菌

CMCC 63542

+++

黄色菌落,无沉淀环

 

图1 MYP琼脂微生物质控结果

备注:a:蜡样芽孢杆菌CMCC63303,b:蜡样芽孢杆菌CICC21261,c:大肠埃希氏菌,d:枯草芽孢杆菌


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