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军团菌琼脂培养基的使用说明及注意事项
许英俊
2020-3-31 10:05:44 青岛海博生物

一、培养基的简单介绍:

 (1)缓冲活性炭酵母琼脂(BCYE Agar;Buffered Charcoal Yeast Extract Agar),是由活性炭酵母琼脂(CYE Agar)改良而来,主要增加了缓冲剂(ACES Buffer),这种缓冲剂有利于生长条件要求苛刻的某些军团菌生长。

 (2)有关该培养基的原理、配方和菌落特征等知识,请参考BCYE培养基原理及实验现象:BCYE培养基原理及实验现象 点击查看相关文章,本篇文章主要对该培养基使用时的一些注意事项做一下补充说明。

 

二、培养基的制备方法

 (1)有关该培养基的配制方法,经典文献中是这样描述的:

  a、先将酵母浸粉和琼脂混合于水中加热、溶解,然后加入活性炭和ACES缓冲剂,混匀,121℃高压灭菌15分钟;

  b、待冷却至45-50℃,无菌加入已过滤除菌的4%L-半胱氨酸盐酸盐水溶液10ml和2.5%焦磷酸铁盐水溶液10ml,混合均匀,用氢氧化钾4-5ml,将pH调至6.8-7.0,倾入无菌平皿。

 (2)为了方便使用,可选用我公司生产的干粉培养基和配套成品试剂,使用方法如下:

称取本品38.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,每瓶100ml,121℃高压灭菌15分钟,冷至50℃左右时,加入1支L-半胱氨酸盐酸盐(0.04g/支)和1支可溶性焦磷酸铁(0.025g/支),混匀,倾入无菌平皿。

注:若加入一套BCYE抑菌剂可配制成选择性平板。加入添加剂后若pH值不正确,用KOH进行调整。

 

三、注意事项:

 上述培养基的两种制备方法中,尤其要注意两点:

 (1)可溶性焦磷酸铁盐【Fe4(P2O7)3】水溶液配置后,必须保存于黑暗干燥处,如果变成黄或褐色则不能再使用。加热时,不要超过60℃,50℃水浴可使其溶化完全。

 (2)倾注平皿时,需不停摇动,使活性炭在琼脂中分布均匀。

 

四、更多选择:

 

 如果觉得上面两种配制方法比较繁琐,还可以选用我们公司生产的BCYE即用型培养基平板等相关产品。


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