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强化梭菌培养基(RCM)原理及实验现象
张文慧
2020-7-1 9:48:21 青岛海博生物

一、培养基用途:

  用于梭菌的增菌培养和计数。


二、培养基成分及使用方法:

  1.培养基成分

成分

含量(g/L)

蛋白胨

10.0

牛肉浸粉

10.0

酵母粉

3.0

葡萄糖

5.0

可溶性淀粉

1.0

氯化钠

5.0

醋酸钠

3.0

L-半胱氨酸盐酸盐

0.5

琼脂

0.5

pH 6.8±0.1 25℃

 

2.使用方法

  称取本品38.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装于试管中,每支10mL,每支试管上方用液体石蜡覆盖。121℃高压灭菌15分钟。

 

三、原理:

  蛋白胨、牛肉浸粉、酵母粉、可溶性淀粉和L-半胱氨酸盐酸盐提供碳源、氮源、维生素和生长因子;葡萄糖为可发酵糖类;氯化钠维持均衡的渗透压;醋酸钠可抑制革兰氏阴性菌;微量琼脂(0.5g)增加了其还原环境的稳定性,可以防止液体对流,即防止二氧化碳、氧气和还原产物的扩散,有利于厌氧环境的形成;无动力的细菌在此培养基中呈颗粒状或条状生长,可进行计数;有动力的细菌在培养基中通常呈浑浊生长,一般不能计数。

 

四、实验结果:

  1、按使用方法制备培养基,接种以下质控菌株,在30-35℃厌氧培养48小时。

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

生长情况(回收率)

其他特征

生孢梭菌

CMCC(B)64941

10-100

良好

浑浊

产气荚膜梭菌

ATCC13124

10-100

良好

浑浊


   2、产气荚膜梭菌和生孢梭菌在培养基中的生长情况如下图所示:

强化梭菌培养基(RCM)微生物质控结果

a:产气荚膜梭菌,b:生孢梭菌


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