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嗜冷菌计数琼脂(乳平板计数琼脂)的原理和使用方法
王娟
2020-7-8 9:28:16 青岛海博生物

一、试验原理:

 

 用于乳制品中嗜冷菌菌落总数和需氧芽孢总数的测定。

 胰蛋白胨、脱脂奶粉提供碳源和氮源;酵母浸膏提供B族维生素;葡萄糖提供能源;琼脂是培养基的凝固剂。

 

二、培养基配方(g/L):

 

胰蛋白胨

5.0

酵母浸膏

2.5

葡萄糖

1.0

琼脂

15.0

脱脂奶粉

1.0

pH 7.0±0.1

25℃

此配方可以进行改良或增加营养成分以获得最佳的结果

三、试验方法:

 

 1、称取本品24.5g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌15分钟,冷却至50℃左右时,倾入无菌平皿,备用。

 2、使用前,把制备好的平板放置室温10-20分钟。

 3、制备质控菌液。

 4、选择合适稀释度的质控菌液0.1ml,均匀涂布于待测平板以及参比平板上,每一稀释度接种两个平板。

 5、6.5±0.5℃倒置培养基培养10天,记录实验结果。


四、结果观察与解释 

                                         

 1、理化指标

检测项目

标准指标

水份(%)

<6

pH值(25℃)

6.9-7.1

澄清度

溶液稍浑

软硬度

适中

干粉颜色

淡黄色

制备好的培养基的颜色

淡黄色固态


嗜冷菌计数琼脂干粉状态

 

 2、微生物试验

 接种以下质控菌株,6.5±0.5℃需氧培养10天:

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

参比或计数培养基

方法

质控评定标准

其他特征

单增李斯特氏菌

ATCC19114

20-200

TSA

定量

PR≥0.7

无色透明小菌落

小肠结肠炎耶尔森菌

ATCC23715

20-200

TSA

定量

PR≥0.7

白色菌落


MPC琼脂培养基微生物质控结果

备注:a:单增李斯特氏菌,b:小肠耶尔森氏菌


五、注意事项

 

 本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。


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 注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。

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