四号琼脂培养基的使用原理及方法

杨永帅

2020-10-12 10:14:34 青岛海博生物

一、实验原理：

用于霍乱弧菌选择性分离培养。蛋白胨、牛肉粉提供碳氮源、维生素和生长因子；氯化钠维持均衡的渗透压；亚硫酸钠可刺激弧菌生长；柠檬酸钠、十二烷基硫酸钠、牛胆粉、利凡诺、庆大霉素和亚碲酸钾及较高的pH 可抑制革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性杂菌；霍乱弧菌对酸性环境比较敏感，因此该pH 值可增强其生长；琼脂是培养基的凝固剂。

二、实验方法：

称取本品 60.0g ,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,冷至50-55℃时,每 1000ml 培养基中加入无菌 1% 亚碲酸钾溶液 1ml,混匀,倾入无菌平皿,备用。使用前，把制备好的平板放置室温10-20分钟。

1、制备质控菌液。

2、将质控菌液划线于平板上。

4、36±1℃倒置培养基培养14-18小时，记录实验结果。

三、结果判定：

接种以下质控菌株，36±1℃倒置培养基培养14-18小时：

质控菌株	菌株编号	生长情况	其他特征
霍乱弧菌（海水）	/	+++	菌落扁平湿润，中心黑色，直径2-3mm。
非O1群霍乱弧菌	/	+++	菌落扁平湿润，中心黑色，直径2-3mm。
粪肠球菌	ATCC29212	-	菌落针尖大小。
大肠埃希氏菌	ATCC25922	-	/
副溶血性弧菌	ATCC17802	+++	菌落小于1mm。