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硫酸锰营养琼脂原理和使用方法
张辉
2020-10-22 10:39:08 青岛海博生物

一、试验原理:


  硫酸锰营养琼脂用于需氧芽孢杆菌的芽孢培养。

  胰蛋白胨和酵母浸粉作为培养基中的基础营养物质,提供细菌生长所需的碳氮源、维生素和其他的生长因子;葡萄糖为可发酵糖类;磷酸二氢钾作为培养基的缓冲剂;硫酸锰可促进芽孢的生成;琼脂是培养基的凝固剂。


二、培养基配方(g/L):


硫酸锰

0.0308

胰蛋白胨

5.0

酵母浸粉

5.0

葡萄糖

5.0

磷酸二氢钾

4.0

琼脂

13.0

pH值7.2±0.2(25℃)


三、试验方法:


  1.称取本品32.03g,加热搅拌溶解于1000mL蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌15分钟,冷至45-50℃,倾入无菌平皿,备用。

  2.制备质控菌液;

  3.选择合适稀释度的质控菌液100μL,均匀涂布于待测培养基上,每一稀释度接种两个平板,同时接种TSA平板作为计数培养基;

  4.放置30±1℃需氧培养24±2小时,记录试验结果。


四、试验结果判断:


  接种以下质控菌株,30±1℃需氧培养24±2小时。

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

参比或计数培养基

方法

质控结果

其他特征

蜡样芽孢杆菌

CMCC(B) 63303

10-100

TSA

定量

PR≥0.7

白色不规则大菌落

枯草芽孢杆菌

ATCC 6633

10-100

TSA

定量

PR≥0.7

白色不规则菌落

  硫酸锰营养琼脂质控结果:



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