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一、实验原理：
本培养基用于霍乱弧菌的生化试验（SN标准）
牛肉粉、酵母粉、月示蛋白胨、蛋白胨提供氮源、维生素和矿物质，乳糖、葡萄糖是可发酵的糖，氯化钠维持均衡的渗透压，琼脂是培养基的凝固剂。
二、培养基配方（g/L）：
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成分 |
用量 |
|
|
牛肉粉 |
3.0 |
|
|
酵母粉 |
3.0 |
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月示蛋白胨 |
15.0 |
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|
蛋白胨 |
5.0 |
|
|
乳糖 |
5.0 |
|
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葡萄糖 |
1.0 |
|
|
硫酸亚铁 |
0.2 |
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氯化钠 |
20.0 |
|
|
硫代硫酸钠 |
0.3 |
|
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琼脂 |
12.0 |
|
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酚红 |
0.024 |
|
|
pH7.2-7.6 |
25℃ |
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三、实验方法：
称取本品 64.5g，加热溶解于1000ml 蒸馏水中，分装于试管内的 3/4 左右高度，121℃高压灭菌 15 分钟，放置高层斜面备用。
四、结果观察与解释
按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养18-24小时。
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质控菌株 |
菌株编号 |
接种量（CFU） |
生长情况 |
其它特征 |
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霍乱弧菌非01群 |
HB081127A-1 |
/ |
+++ |
K/A，H2S（-），产气（-） |
|
副溶血性弧菌 |
ATCC17802 |
/ |
+++ |
K/A，H2S（-），产气（-） |
|
溶藻弧菌 |
ATCC17749 |
/ |
+++ |
K/A，H2S（-），产气（-） |
|
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
/ |
+++ |
A/A，H2S（-），产气（+） |
|
鼠伤寒沙门氏菌 |
ATCC14028 |
/ |
+++ |
K/A，H2S（+），产气（+） |
|
普通变形杆菌 |
ATCC13315 |
/ |
+++ |
K/A，H2S（+），产气（+） |
实验结果现象与说明：
1.霍乱弧菌非01群、副溶血性弧菌、溶藻弧菌
斜面红/底层黄：发酵葡萄糖但不发酵乳糖，是不发酵乳糖的特征的菌类。
2.大肠埃希氏菌
斜面黄/底层黄：既发酵乳糖也发酵葡萄糖，产生大量的酸使整个培养基呈黄色，同时有产气现象。
3.鼠伤寒沙门氏菌、普通变形杆菌
斜面红/底层黄（部分区域黑色）：发酵葡萄糖但不发酵乳糖同时产生硫化氢，是产硫化氢不发酵乳糖特征。
硫化氢的产生：这类菌能分解含硫氨基酸，生成硫化氢，硫化氢和培养基中的铁盐反应生成黑色的硫化亚铁沉淀。
五、注意事项
能产生硫化氢的菌应及时观察试验结果，以免生成的硫化铁形成黑色区域，遮盖斜面与底层的颜色影响判断结果。
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注：本文属海博生物原创，未经允许不得转载。
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