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去氧胆酸盐枸橼酸盐琼脂的原理和使用方法
林娇娇
2021-4-26 11:19:57 青岛海博生物

一、培养基用途


 本培养基用于革兰氏阴性肠杆菌的分离培养。


二、试验原理


 牛肉粉、蛋白胨为微生物的生长提供氮源、碳源及维生素;乳糖是可发酵的糖类;柠檬酸钠、柠檬酸铁铵和去氧胆酸钠可抑制革兰氏阳性菌的生长;中性红为pH指示剂,发酵乳糖产酸的细菌菌落为红色,不发酵乳糖的细菌菌落为无色;琼脂是培养基的凝固剂。


三、培养基配方(g/L)


牛肉粉 

9.5

蛋白胨

10.0

乳糖

10.0

柠檬酸钠

20.0

柠檬酸铁铵

2.0

去氧胆酸钠

5.0

中性红

0.02

琼脂

13.0

pH值7.3±0.2 25℃


四、试验方法


 1、称取本品69.52g,加热搅拌溶解于1000mL蒸馏水中,煮沸1分钟,冷至50℃左右时,倾入无菌平皿中,无需高压灭菌。


 2、制备质控菌液,接种到培养基上。


 3、放置于36±1℃恒温培养箱中需氧培养18-24小时。


五、结果观察与解释


 接种以下质控菌株,放置于36±1℃恒温培养箱中需氧培养18-24小时。

质控菌株

菌株编号

接种量

回收率

生长情况

其它特征

福氏志贺氏菌

ATCC 12022

10-100

≥70%

+++

无色透明菌落

鼠伤寒沙门氏菌

ATCC 14028

10-100

≥70%

+++

无色透明菌落

大肠埃希氏菌

ATCC 25922

100-1000

<10%

+/﹣

粉红色菌落,有胆盐沉淀环

粪肠球菌

ATCC 29212

100-1000

/

-

抑制


 去氧胆酸盐枸橼酸盐琼脂培养基微生物质控结果:






福氏志贺氏菌

无色透明菌落




鼠伤寒沙门氏菌

无色透明菌落











大肠埃希氏菌

粉红色菌落,有胆盐沉淀环




粪肠球菌

抑制

  

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