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VRBGA琼脂培养基的原理和使用方法
刘浩然
2022-4-12 14:21:47 青岛海博生物

一、试验原理

  本培养基用于肠杆菌科的分离培养。

  酵母浸粉和蛋白胨提供碳氮源和微量元素;氯化钠可维持均衡的渗透压;葡萄糖是可发酵的糖类;胆盐和结晶紫抑制革兰氏阳性菌,特别抑制革兰氏阳性杆菌和粪肠球菌;中性红为pH指示剂发酵葡萄糖产酸使中性红指示剂变色,从而使菌落呈红色。


二、培养基配方(g/L)

酵母浸粉

3.0

蛋白胨

7.0

氯化钠

5.0

葡萄糖

10.0

3号胆盐

1.5

结晶紫

0.002

中性红

0.03

琼脂

12.0

pH 7.4 ± 0.2 25℃


三、试验方法

  1、称取本品39.5 g,加热溶解于1000 mL蒸馏水中,煮沸不用超过2分钟,无需高压灭菌,备用。

  2、制备质控菌株,接种到培养基上。

  3、放置于36℃±1℃恒温培养箱中,需氧培养24 h±2 h。


四、质控结果

  接种以下质控菌株,放置于36℃±1℃恒温培养箱中需氧培养24 h±2 h。

质控菌株

菌株编号

接种量

(CFU)

回收率

生长情况

其它特征

大肠埃希氏菌

ATCC 8739

10-100

≥70%

+++

红色菌落,有胆盐沉淀环

鼠伤寒沙门氏菌

ATCC 14028

10-100

≥70%

+++

红色菌落,有胆盐沉淀环

福氏志贺氏菌

ATCC 12022

10-100

≥70%

+++

红色菌落,有胆盐沉淀环

金黄色葡萄球菌

ATCC 6538

100-1000

/

-

抑制


图1 VRBGA琼脂培养基微生物质控结果


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