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改良沙氏琼脂培养基的原理及使用方法
李令梅
2022-9-19 16:23:21 青岛海博生物

一、试验原理:

  用于真菌的培养。

  蛋白胨提供碳源和氮源;麦芽糖提供能源;氯霉素能够抑制细菌的生长;琼脂是培养基的凝固剂。

二、培养基配方(g/L):

蛋白胨

10.0

麦芽糖

20.0

琼脂

18.0


三、试验方法:

  1. 称取本品48.0g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,115℃高压灭菌10分钟,冷却至50℃左右时(可加入过滤除菌氯霉素,使其最终浓度为50mg/ml,混匀),倾入无菌平皿。

  2. 制备好的平板保存于2-8℃,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处,室温保存。

  3. 使用前,把制备好的平板放置室温10-20分钟。

  4. 制备质控菌液

  5. 选择合适稀释度的质控菌液0.1ml,均匀涂布于平板上,每一稀释度接种两个平板。

  6. 20-25℃倒置培养基培养48-72小时,记录实验结果


四、结果观察与解释

  接种以下质控菌株,20-25℃倒置培养基培养48-72小时:

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

参比或计

数培养基

方法

质控评定标准

其他特征

白色念珠菌

CMCC(F)98001

50-100

沙氏葡萄

糖琼脂

定量

PR≥0.7

白色菌落

黑曲霉

CMCC(F)98003

50-100

PR≥0.7

有黑色孢子

大肠埃希氏菌

CMCC(B)44102

100-1000

/

半定量

G≤1

/


图1 改良沙氏琼脂培养基微生物质控结果

备注:a:黑曲霉,b:白色念珠菌,c:大肠埃希氏菌


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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。


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