GYP白亚琼脂培养基原理及现象

王娟

2022-11-9 16:49:06 青岛海博生物

一、用途及原理

该培养基用于乳酸菌的分离培养。

培养基中的蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉提供细菌生长所需的碳源、氮源、维生素等成分，乙酸钠、吐温80可促进乳酸菌的生长，叠氮化钠对革兰氏阴性菌有一定的抑制作用，硫酸镁、硫酸锰、硫酸亚铁提供微量元素，氯化钠维持渗透压，琼脂为凝固剂，碳酸钙为指示剂，乳酸菌可在此培养基中生长，分解葡萄糖产大量乳酸，使培养基的pH下降，碳酸钙被溶解，菌落周围变透明。

二、培养基配方（g/L）

葡萄糖	10.0
酵母浸粉	10.0
蛋白胨	5.0
牛肉浸粉	2.0
吐温80	0.5
乙酸钠	2.0
叠氮化钠	0.01
硫酸镁	0.2
硫酸锰	0.01
硫酸亚铁	0.01
氯化钠	0.01
碳酸钙	5.0
琼脂	12.0
pH	6.8±0.1

三、配制方法

称取本品46.74克，加热溶解于1000ml蒸馏水中，121℃高压灭菌15分钟，冷区后倾入无菌平皿，备用。

注：培养基中的碳酸钙不溶于水，溶解后需充分摇匀，使碳酸钙分布均匀，制成的平板应为淡黄色不透明固体。

四、生长现象及结果观察

接种以下质控菌株，在30℃下培养3-7天：

质控菌株	菌株编号	接种量/CFU	回收率	生长现象
鼠李糖乳杆菌	ATCC7469	20-200	≥70%	白色圆形凸起菌落，周围有透明溶钙环
植物乳杆菌	ATCC8014	20-200	≥70%	白色圆形凸起菌落，周围有透明溶钙环