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RaKa-Ray培养基原理及实验现象
卢悦
2023-3-3 10:58:21 青岛海博生物

一、培养基用途:

  用于啤酒中乳酸菌检测的分离培养基。


二、原理:

  酵母浸粉、酪胨和肝浸粉提供氮源、维生素、生长因子;葡萄糖、麦芽糖和果糖提供碳源;磷酸氢二钾为缓冲剂;柠檬酸铵、硫酸镁、硫酸锰、吐温-80和N-乙酰葡萄糖胺为培养各种乳酸菌提供生长因子;本培养基pH较低,抑制了其它细菌的生长,有利于乳酸杆菌的分离;琼脂是培养基的凝固剂。为增加选择性可加入2-苯乙醇和放线菌酮,可抑制革兰氏阴性菌和酵母菌。


三、培养基成分

成分

含量(g/L)

酵母浸粉

5.0

酪胨

20.0

肝浸粉

1.0

麦芽糖

10.0

果糖

5.0

葡萄糖

5.0

盐酸甜菜碱

2.0

柠檬酸铵

2.0

天门冬氨酸钾

2.5

硫酸镁

0.98

硫酸锰

0.42

磷酸氢二钾

2.0

N-乙酰葡萄糖胺

0.5

谷氨酸钾

2.5

琼脂

16

pH 5.2-5.6 25℃


四、操作方法

  1、称取本品74.9g,另取吐温80 10g,混匀,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌15分钟,制备成平板备用。

  注:该培养基溶解后可能出现少量沉淀。

  2、制备质控菌液

  3、选择合适稀释度的目标菌质控菌液0.1ml,均匀的涂布于平板上,每一稀释度涂布两个平板。

  4、36±1℃培养48±2小时,记录实验结果。


五、实验结果

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

其他特征

嗜酸乳杆菌

CICC6005

10-100CFU

白色凸起菌落

植物乳杆菌

ATCC8014

10-100CFU

白色凸起菌落

大肠埃希氏菌

ATCC25922

/

抑制或部分抑制


注:A为嗜酸乳杆菌;B为植物乳杆菌;C为大肠埃希氏菌

注:A为嗜酸乳杆菌;B为植物乳杆菌;C为大肠埃希氏菌


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