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HC琼脂原理和使用方法
张辉
2023-7-21 13:38:06 青岛海博生物

一、用途及试验原理:

  该培养基用于化妆品中霉菌总数测定。

  胰蛋白胨、䏡蛋白胨和酵母浸粉提供微生物生长所需的碳氮源、维生素和生长因子;葡萄糖为可发酵的糖类;磷酸氢二钠和磷酸二氢钾为培养基pH缓冲剂;氯化铵、硫酸镁和碳酸钠提供微生物生长所需的离子;氯霉素可抑制细菌的生长;吐温80可中和防腐剂,同时可起到分散作用;琼脂为培养基的凝固剂。


二、培养基配方(g/L):

胰蛋白胨

2.5

䏡蛋白胨

2.5

酵母浸粉

5.0

葡萄糖

20.0

磷酸氢二钠

3.5

磷酸二氢钾

3.4

氯化铵

1.4

硫酸镁

0.06

氯霉素

0.1

碳酸钠

1.0

琼脂

15.0

pH值7.0±0.2(25℃)


三、试验方法:

  1. 称取本品54.5g,另称取吐温80 20mL,加热溶解于1000mL蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,混匀,倾入无菌平皿。

  2. 10倍梯度稀释法制备质控菌株菌悬液。

  3. 吸取质控菌液涂布接种于待测培养基和沙氏葡萄糖琼脂上。

  4. 放置于28℃±1℃需氧培养72h±2h,观察试验结果。


四、试验结果判断:

  接种以下质控菌株,放置于28℃±1℃需氧培养72h±2h,试验结果如图1所示。

质控菌株

菌株编号

接种量

(CFU)

参比或计

数培养基

方法

质控结果

其他特征

白色念珠菌

ATCC 10231

20-200

沙氏葡萄糖琼脂

定量

PR≥0.7

白色突起菌落

酵母菌

ATCC 18790

20-200

沙氏葡萄糖琼脂

定量

PR≥0.7

白色突起菌落

黑曲霉

ATCC 16404

20-200

沙氏葡萄糖琼脂

定量

PR≥0.7

有黑色孢子

大肠埃希氏菌

ATCC 25922

/

/

半定量

G≤1

/


HC琼脂微生物质控结果

图1 HC琼脂微生物质控结果


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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。


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