3%NaCl精氨酸双水解酶生化管使用方法

李令梅

2023-10-7 16:06:27 青岛海博生物

一、培养基用途：

用于副溶血性弧菌生化鉴定。

二、原理：

某些细菌可产生精氨酸脱羧酶，使精氨酸脱去羧基，生成精胺，从而使培养基变碱性并通过指示剂变色来观察。脱羧酶是适应酶或称诱导酶，对底物有特异性，在无相对氨基酸的培养基中不产生此酶，并且需要酸性环境和适宜温度。故在培养基中加入葡萄糖，使细菌发酵葡萄糖产酸，以利于脱羧酶的产生。氨基酸的分解是在厌氧条件下进行，故在培养基表面加液体石蜡。由于细菌发酵葡萄糖产酸，在培养初期培养基和对照培养基呈黄色，继续培养时，若氨基酸经脱羧或水解产生胺类则培养基变碱，呈紫色或紫红色，即为阳性反应；如至培养末期培养基如同对照管一样均呈黄色，则判为阴性反应。

三、培养基成分

成分	含量（g/L）
酵母浸粉	3.0
L-精氨酸	5.0
葡萄糖	1.0
溴甲酚紫	0.016
氯化钠	30.0
pH 6.7±0.1 25℃

四、操作方法

1、用磨砂轮在安瓿瓶颈部划线一圈，掰开待用；

2、将标准储备菌株接种到非选择性肉汤中或采用其他制备方法，制备成5 McFarland浊度（约109CFU/ml）的菌悬液；

3、吸取0.05ml-0.08ml(约1-2滴)菌悬液至3%NaCl精氨酸双水解酶生化管生化管，36±1℃培养24±2h后，观察试验结果。

五、实验结果

接种以下质控菌株，36±1℃培养24±2h：

质控菌株	菌株编号	生长情况	其他特征
副溶血性弧菌	ATCC17802	+++	阴性，黄色
普通变形杆菌	ATCC13315	+++	阴性，黄色
溶藻弧菌	ATCC17749	+++	阴性，黄色
阪崎肠杆菌	ATCC29004	+++	阳性，紫色
创伤弧菌	ATCC27562	+++	阴性，黄色