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亚硫酸铁多粘菌素B琼脂的原理和使用方法
王洪淑,
2023-11-10 15:19:54 青岛海博生物

一、用途及试验原理

  用途:本培养基一般用于亚硫酸还原梭状芽孢杆菌的计数。

  原理:胰蛋白胨和酵母浸粉用于提供氮源,柠檬酸铁铵和亚硫酸钠提供还原性并产生硫化氢使菌落呈黑色,多粘菌素B和硫酸新霉素可以抑制非还原性梭状芽孢杆菌的生长,琼脂为凝固剂。


二、培养基配方(g/L)

胰蛋白胨

15.0

酵母浸粉

10.0

亚硫酸钠

1.0

柠檬酸铁铵

0.5

琼脂

16.0

pH值7.6±0.1(25℃)


三、试验方法

  1、称取本品42.5g,加热溶解于1000mL蒸馏水中,分装,每瓶200mL,121℃高压灭菌15分钟,冷至45℃-50℃时,无菌加入一支多粘菌素B(4μg,HB0304-2a)和一支硫酸新霉素(100μg,HB0304-2b),混匀,倾入无菌平皿,备用。

  2、制备质控菌液,接种到该培养基上。

  3、放置于37℃±1℃恒温培养箱中,厌氧培养24h-48h。


四、质控结果

接种以下质控菌株,放置37℃±1℃恒温培养箱中,厌氧培养24h-48h。结果如图1所示。

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

回收率

生长情况

其他特征

产气荚膜梭菌

ATCC 13124

10-100

≥70%

+++

黑色菌落

产气荚膜梭菌B型

/

10-100

≥70%

+++

黑色菌落

大肠埃希氏菌

ATCC 25922

100-1000

/

-

抑制


图1 亚硫酸铁多粘菌素B琼脂的微生物质控结果


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