一、菌株制备

  活化：将所需的质控菌株接种至非选择性平板上培养至菌落适宜大小。

  注：对于一般生长速度较快的菌株，过夜培养即可；生长速度慢的菌株可适当延长培养时间。

  菌悬液制备（接种液体培养基使用）：挑取平板上的纯菌落至生理盐水中，制成约5麦氏浊度的菌悬液（约10⁹CFU/mL）。

  注：此处不建议使用肉汤培养物制备菌悬液，肉汤培养基中含有的成分可能会对部分试验结果造成影响，因此宜采用平板上的菌落制备菌悬液。

二、接种方法及注意事项说明

  1.液体类鉴定培养基：吸取50-100μL制备好的菌悬液加入制备好的培养基中，置于标准规定的条件下进行培养。也可用接种针或接种环挑取待测菌落，直接接种至培养基中。

  注：一般情况下，接种的菌悬液浓度越大，可以更早的观察到试验结果；但对于需观察是否浑浊的生化试验，接种的菌悬液浓度和体积不宜过大。

  2.半固体/固体摆直立类培养基：用接种针挑取平板上的菌落，垂直穿刺接种。

  3.平板点种：用接种环或接种针挑取平板上的菌落，点种于平板上，接种不宜太过密集。

  4.平板划线：用接种环挑取菌落或菌悬液，在平板上分区划线。

  5.长斜面：用接种环或接种针挑取菌落在斜面上“之”字形划线。

  6.高层斜面：用接种针挑取菌落，在斜面上“之”字形划线，并穿刺底层。

三、结果观察

  接种对应的阴阳性菌株，应出现对应的阳性或阴性反应，或特定的现象，即为培养基合格。

  注：需添加试剂观察现象的，应严格按照说明书操作。

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