洋葱伯克霍尔氏菌鉴定培养基检验原理和使用方法

张辉

2024-6-27 11:34:47 青岛海博生物

一、产品用途及原理：

该培养基用于洋葱伯克霍尔氏菌的分离培养。

酪蛋白胨和酵母浸粉提供微生物生长所需的碳氮源、维生素和生长因子；乳糖和蔗糖为可发酵的糖类；氯化钠维持均衡的渗透压；酚红为酸碱指示剂；结晶紫可抑制革兰氏阳性菌的生长；琼脂为培养基的凝固剂。庆大霉素为广谱抗生素，对多数假单胞菌属、变形杆菌属、大肠菌群、葡萄球菌属、需氧芽孢杆菌属等多种革兰氏阴阳性菌有较强的抗菌活性；万古霉素可抑制细菌细胞壁的合成，对金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、肺炎链球菌等作用强，对艰难梭菌、炭疽杆菌、白喉杆菌等作用也良好；多粘菌素B对绿脓杆菌、大肠杆菌、克雷伯氏菌及嗜血杆菌等多种革兰氏阴性菌有抑制作用。

二、培养基配方（g/L）：

Casein Peptone/酪蛋白胨	10.0
Lactose/乳糖	10.0
Sucrose/蔗糖	10.0
Sodium Chiloride/氯化钠	5.0
Yeast Extract/酵母浸粉	1.5
Phenol Red/酚红	0.08
Crystal Violet/结晶紫	0.002
Agar/琼脂	14.0
pH值6.8±0.3（25℃）

三、试验方法：

1. 称取本品50.58g，加热煮沸完全溶解于1000mL蒸馏水中，分装三角瓶，每瓶200mL，121℃高压灭菌15分钟。冷却至45℃-50℃时，每200mL培养基中加入1支庆大霉素Gentamicin添加剂（2mg）、1支万古霉素Vancomycin添加剂（0.5mg）和1支多粘菌素B Polymyxin B添加剂（120000U），混匀，倾入无菌平皿备用。

2. 将质控菌株划线接种于培养基平板上。

3. 放置于恒温培养箱36℃需氧培养18-24小时，观察试验结果。

四、试验结果判断：

接种以下质控菌株，放置于36℃需氧培养18-24小时，试验结果如图1所示。

质控菌株	菌株编号	方法	质控结果	其他特征
洋葱伯克霍尔德氏菌	ATCC 25416	定性	生长良好	无色菌落，周围培养基变红
大肠埃希氏菌	ATCC 25922	定性	/	抑制
金黄色葡萄球菌	ATCC 25923	定性	/	抑制
铜绿假单胞菌	ATCC 27853	定性	/	抑制