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志贺氏菌(BCT)增菌液原理及实验现象
卢悦
2024-11-21 16:44:35 青岛海博生物

一、培养基用途:

  用于志贺氏菌増菌培养。


二、培养基成分:

成分

含量(g/L)

蛋白胨

20.0

复合氨基酸

2.0

牛肉浸粉

5.0

三号胆盐

4.5

柠檬酸钠

4.5

硫代硫酸钠

4.5

pH 7.2±0.1 25℃


三、原理:

  蛋白胨,复合氨基酸,牛肉浸粉提供蛋白质,维生素和氨基酸;牛胆盐为选择性抑菌剂,抑制革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性菌生长,对革兰氏阴性菌杆菌只有轻微的抑制能力。


四、操作方法

  1、称取本品40.5g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装试管,121℃高压灭菌15min。

  2、制备工作菌悬液。

  3、接种

  目标菌(褔氏志贺氏菌CMCC(B) 51572):接种10CFU-100CFU/管,接种体积不超过1mL,接种两个平型管。同时将1mL菌悬液(与试管同一稀释度)倾注平板(或适宜稀释度0.1mL涂布平板)接种两个平板,做接种量计数用。

  非目标菌(金黄色葡萄球菌CMCC(B) 26305):接种1000CFU-5000CFU/管,接种体积不超过1mL,接种两个平型管。同时将1mL菌悬液(比待测培养基试管接种小10-100倍稀释度)倾注平板(或适宜稀释度0.1mL涂布平板)接种两个平板,做接种量计数用。

  接种后41.5℃±1℃培养16-20小时。

图一: 志贺氏菌(BCT)增菌液41.5℃培养18小时后

  4、41.5℃±1℃培养16-20小时

  目标菌(褔氏志贺氏菌CMCC(B) 51572):吸取10ul培养液均匀涂布或螺旋涂布到XLD平板。

  非目标菌(金黄色葡萄球菌CMCC(B) 26305):吸取10ul培养液均匀涂布或螺旋涂布到非选择性平板上(如:TSA)。

  5、接种后的培养基置于36℃±1℃培养24±2h

图二:试管转接平板后试验现象

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

质量评定标准

特征性反应

褔氏志贺氏菌

CMCC(B) 51572

10-100

在XLD上>10CFU

无色透明菌落

金黄色葡萄球菌

CMCC(B) 26305

1000-5000

在TSA上<100CFU

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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。

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