一、培养基用途:
用于志贺氏菌増菌培养。
二、培养基成分:
成分 |
含量(g/L) |
蛋白胨 |
20.0 |
复合氨基酸 |
2.0 |
牛肉浸粉 |
5.0 |
三号胆盐 |
4.5 |
柠檬酸钠 |
4.5 |
硫代硫酸钠 |
4.5 |
pH 7.2±0.1 25℃ |
三、原理:
蛋白胨,复合氨基酸,牛肉浸粉提供蛋白质,维生素和氨基酸;牛胆盐为选择性抑菌剂,抑制革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性菌生长,对革兰氏阴性菌杆菌只有轻微的抑制能力。
四、操作方法
1、称取本品40.5g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装试管,121℃高压灭菌15min。
2、制备工作菌悬液。
3、接种
目标菌(褔氏志贺氏菌CMCC(B) 51572):接种10CFU-100CFU/管,接种体积不超过1mL,接种两个平型管。同时将1mL菌悬液(与试管同一稀释度)倾注平板(或适宜稀释度0.1mL涂布平板)接种两个平板,做接种量计数用。
非目标菌(金黄色葡萄球菌CMCC(B) 26305):接种1000CFU-5000CFU/管,接种体积不超过1mL,接种两个平型管。同时将1mL菌悬液(比待测培养基试管接种小10-100倍稀释度)倾注平板(或适宜稀释度0.1mL涂布平板)接种两个平板,做接种量计数用。
接种后41.5℃±1℃培养16-20小时。
图一: 志贺氏菌(BCT)增菌液41.5℃培养18小时后
4、41.5℃±1℃培养16-20小时
目标菌(褔氏志贺氏菌CMCC(B) 51572):吸取10ul培养液均匀涂布或螺旋涂布到XLD平板。
非目标菌(金黄色葡萄球菌CMCC(B) 26305):吸取10ul培养液均匀涂布或螺旋涂布到非选择性平板上(如:TSA)。
5、接种后的培养基置于36℃±1℃培养24±2h
图二:试管转接平板后试验现象
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
质量评定标准 |
特征性反应 |
褔氏志贺氏菌 |
CMCC(B) 51572 |
10-100 |
在XLD上>10CFU |
无色透明菌落 |
金黄色葡萄球菌 |
CMCC(B) 26305 |
1000-5000 |
在TSA上<100CFU |
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