1、配制洗涤液取浓缩洗涤液1瓶，加入蒸馏水240ml，混匀，装入洗瓶内或自动洗板机内待用。 
2、稀释标本将标本编号，在小试管内加稀释液100ul，蒸馏水500ul为应用稀释液，加待测血清6ul（1：100稀释）。 
3、加样本第1孔加入阴性对照100ul，第2孔加入阳性对照。100ul，第3孔开始依次加入已稀释的待测标本100ul，并设置空 白对照孔。将反应条置37℃水浴箱中温浴。 
4、加酶结合物15分钟后取出，弃去孔中液体，用洗涤液洗3次，吸干或甩干。然后在每孔中加人酶标抗体各2滴，置37℃,15分钟后取出，弃去孔中液体，用洗涤液洗5次。方法同上。 
5、加底物及终止反应洗涤完毕后每孔加入底物A、底物B. 各1滴，置37℃10分钟，每孔再加终止液1滴终止反应，取出判断结果。