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中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口食品中蜡样芽孢杆菌——5
2008-12-19 13:52:08 青岛海博生物
A7 溶菌酶营养肉汤    
牛肉膏           3.0g    
蛋白胨           5.0g    
蒸馏水           稀释至1000mL       
0.1%溶菌酶溶液 10.0mL    pH6.8±0.1 
 将上述成分(溶菌酶溶液除外)溶解于蒸馏水并稀释至1000mL。校正pH后,分装于烧瓶中,每瓶99mL。121℃高压灭菌15min。于每瓶中加入0.1%溶菌酶溶液1mL,混匀后分装灭菌试管,每管2.5mL。 
 注:溶菌酶溶液:在65mL灭菌的0.1mol/L盐酸中加0.1g溶菌酶。煮沸20min溶解后,再用灭菌的0.1mol/L 盐酸稀释至100mL。
A8 改良 V-P培养基    
(月示)蛋白胨         7.0g     
葡萄糖            5.0g    
氯化钠            5.0g    pH6.5±0.1 
 将上述各成分溶解于蒸馏水并稀释至1000 mL。校正pH后分装试管,每管5mL。121℃高压灭菌10 min备用。
A9 动力培养基    
胰酪胨 10.0g    
酵母膏            2.5g    
葡萄糖            5.0g    
磷酸氢二钠          2.5g    
琼 脂                       3.0g    
蒸馏水            稀释至1000mL    pH7.4±0.2 
 将上述各成分于蒸馏水加热溶解并稀释至1000 mL。校正pH后,分装试管,每管2mL。121℃高压灭菌10 min备用。
A10 胰酪胨大豆羊血琼脂(TSSB)    
胰酪胨 15.0g    
植物胨            5.0g    
氯化钠            5.0g    
琼 脂                       15.0g    
蒸馏水           稀释至1000mL    pH7.0±0.2 
 将上述各成分于蒸馏水中加热溶解。校正pH后,分装烧瓶,每瓶100mL。121℃高压灭菌15min。水浴中冷至45~50℃加入5mL无菌脱纤维羊血,混匀后倾注平板,每皿18~20mL。 
               附 录 B 试 剂 配 制 (补充件)
B1 Butterfield氏磷酸盐缓冲稀释液 
 在500mL蒸馏水中溶解磷酸二氢钾(KH2PO4) 34.0g,用1mol/L氢氧化钠溶液约175mL校正pH至7.2,再用蒸馏水稀释至1000 mL,制成储存液于冰箱中储存。取原液1.25mL,用蒸馏水稀释至1000 mL。分装试管,每管90 mL,121℃高压灭菌15 min。
B2 亚硝酸盐试剂  
a.  试剂A:对氨基苯磺酸8.0g,溶解于5mol/L,乙酸1000 mL中。  
b.  试剂B:α-萘酚2.5g溶解于5mol/L乙酸1000 mL中。
B3 V-P试剂  
a.  5%α-萘酚溶液:取α-萘酚5.0g溶解于100 mL无水乙醇中。    
b. 40%氢氧化钾溶液:将氢氧化钾40 g于蒸馏水中溶解并稀释至100 mL。  
c. 肌氨酸结晶。
B4 碱性复红染色液  取碱性复红0.5g溶解于20mL乙醇中,再用蒸馏水稀释至100mL,滤纸过滤后储存备用。   
   
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