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我国进出口检验行业标准-副溶血性弧菌检验方法——3
2008-12-25 11:16:29 青岛海博生物
9 培养基及试剂 
9.1 30 g/L氯化钠稀释液  
氯化钠 30.0g;  
蒸馏水1000mL  
  加热溶解,调至pH7.0,121℃高压灭菌15  min,以无菌操作分装于500mL广口瓶或500mL三角瓶,每瓶450 mL以及17mm×170mm试管,每管9mL,做稀释样品用。 
9.2 60  g/L 氯化钠蛋白胨水(PW)  
蛋白胨 10.0g  
氯化钠 60.0g  
蒸馏水  1000mL   
  将各成分加热溶解,调至pH7.2,分装于17mm×170mm试管,每管10mL。120℃高压灭菌15min。 
9.3 氯化钠多粘菌素B肉汤(SPB)   
酵母浸膏  3.0g  
蛋白胨 10.0g  
氯化钠 20.0g  
多粘菌素B 250单位/毫升培养基  
蒸馏水  1000mL   
  将各成分(除多粘菌素B外)加热溶解,稍冷后加入多粘菌素B,调至pH7.4。分装于17mm  ×170mm试管,每管10mL。121℃高压灭菌15min。灭菌后,立即将培养基取出放凉。 
9.4 硫代硫酸钠、柠檬酸钠、胆盐、蔗糖琼脂(TCBS)   
酵母浸膏   5.0g  
蛋白胨    10.0g  
氯化钠    10.0g  
柠檬酸钠   10.0g  
硫代硫酸钠  10.0g   
胆酸钠(以牛胆酸钠代替) 3.0g  
牛胆汁粉(以混合胆盐代替) 5.0g  
蔗 糖    20.0g  
柠 檬酸铁   1.0g  
琼 脂    18.0g  
溴麝香草酚蓝 0.04g  
麝香草酚蓝  0.04g  
蒸馏水    1000mL   
  除指示剂外,将各种成分加热溶解,调至pH8.6,加入指示剂。此培养基不必高压灭菌,煮沸1~2min,待培养基稍凉后倾注平板。  在该平板上,溶藻胶弧菌为黄色菌落,而副溶血性弧菌为蓝绿色菌落。肠球菌、变形菌及大肠菌群有时也会生长,但其菌落一般较小,易与副溶血性弧菌区别。 
9.5 氯化钠三糖铁琼脂(TSI)  
牛肉浸膏  3.0g  
蛋白胨   20.0g  
乳 糖    10.0g  
蔗 糖   10.0g  
葡萄糖   1.0g  
硫酸亚铁  0.5g  
硫代硫酸钠  0.5g  
氯化钠   30.0g  
琼 脂   12.0g  
酚 红   0.024g  
  除琼脂和酚红外,将其他成分用蒸馏水400mL微火加热溶解,同时将琼脂置于600mL蒸馏水中,浸泡数分钟后,加热煮沸使完全溶解。然后将以上两液混合均匀。调至pH7.4,  加入指示剂混匀,分装于15mm×0mm试管,每管3~4mL,115℃高压灭菌15min。灭菌后摆成斜面,使高层和斜面各约3cm。 
9.6 嗜盐性试验用胰胨水(TB)  
胰 胨  40.0g  
酵母浸膏 12.0g  
蒸馏水   4000mL   
  完全溶解后,分成4份,其中3份分别加入30g、70g、100g氯化钠,使成0%、30g/L、  70g/L、00g/L不同浓度的氯化钠胰胨水。调至pH7.5。分装15mm×150mm试管,每管7mL。 121℃高压灭菌15min。    
   
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