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出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法——4
2008-12-26 13:15:17 青岛海博生物
        附录A  培养基和试剂     (补充件)
A1 月桂基硫酸盐胰蛋白(月示)(LST)肉汤  
胰蛋白(月示)或胰酪胨(Trypticase)  20g   
氯化钠               5.0g  
乳糖                5.0g  
磷酸氢二钾(K2HPO4)         2.75g   
磷酸二氢钾(KH2PO4)         2.75g  
月桂基硫酸钠            0.1g  
蒸馏水               1000.0mL  
   将各成分溶解于蒸馏水中。分装到有倒立发酵管的20mm×150mm试管中,每管10mL。121℃高压灭菌15min。最终pH6.8±0.2。
A2 煌绿乳糖胆盐(BGAB)肉汤  
蛋白胨             10.0g  
乳糖              10.0g  
牛胆粉(oxgall或oxbile)溶液   200.0mL   
0.1%煌绿水溶液        13.3mL   
蒸馏水                         1000ml  
  将蛋白胨乳糖溶于约500mL蒸馏水中,加入牛胆粉溶液200mL(将20.0g脱水牛胆粉溶于200 mL蒸馏水中,pH7.0~7.5),用蒸馏水稀释到975mL,调pH7.4。再加入0.1%煌绿水溶液13.3mL,用蒸馏水补足到1000mL,用棉花过滤后,分装到20mm×150mm试管(管内有倒立的小发酵管)中,每管10mL。121℃高压灭菌15min。最终pH7.2±0.1。
A3 EC肉汤  胰蛋白(月示)或胰酪(月示) 20.0g  
3号胆盐或混合胆盐     1.5g   
乳糖           5.0g  
磷酸氢二钾(K2HPO4)    4.0g   
磷酸二氢钾(KH2PO4)    1.5g  
氯化钠          5.0g   
蒸馏水            1000.0mL   
  将以上成分溶解于蒸馏水中,分装16mm×150mm试管(管内有倒立的小发酵管),每管8mL。121℃高压灭菌15min,最终pH6.9±0.1。
A4 伊红美蓝琼脂(EMB)  
蛋白胨       10.0g   
乳糖        10.0g   
磷酸氢二钾(K2HPO4) 2.0g   
琼脂        15.0g  
伊红γ(水溶性)    0.4g或2%水溶液20mL   
美蓝        0.065g或0.5%水溶液13mL   
蒸馏水       1000.0mL  
  在1000mL蒸馏水中煮沸溶解蛋白胨、磷酸盐和琼脂,加水补足至原量。分装于三角烧瓶中。每瓶100mL或200mL,高压灭菌15min。最终pH7.1±0.2。使用前将琼脂融化,于每100mL琼脂中加5mL灭菌的20%乳糖水溶液、2mL的2%伊红γ水溶液和1.3mL0.5%的美蓝水溶液,摇匀,冷至45~50℃倾注平皿。   
   
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