原理：当细菌利用铵盐作为唯一氮源，并利用枸橼酸盐作为唯一碳源时，可在枸橼酸盐培养基上生长，生成碳酸钠，并同时利用铵盐生成氢，使培养基呈碱性。

   方法1：
Simmons氏培养基：
柠檬酸钠                  lg      
K2HPO4                   lg       
硫酸镁                    0.2g     
氯化钠                    5g
琼脂（洗过）              20g
NH4H2PO4                 1g
1％溴麝香草酚蓝酒精溶液   10ml
蒸馏水  加至1，000ml
  调整pH至6.8，15磅15分钟高压灭菌后制成斜面。

  将上述培养基中的琼脂省去，制成液体培养基，同样可以应用。将被检细菌少量接种到培养基中， 37℃培养2～4日，培养基变蓝色者为阳性，不变者为阴性。

方法2：
Christenten氏培养基：
柠檬酸钠                  5g    
KH2PO4                   1g    
葡萄糖                    0.2g  
氯化钠                    5g   
酚红                      0.012g
半胱氨酸                  0.1g
琼脂                      15g
酵母浸膏                  0.5g
蒸馏水加至                1000ml
有的配方尚加柠檬酸铁铵0.4g，硫代硫酸钠0.08g。

    PH不必调整。高压灭菌后做成短厚的斜面。接种时先划线后穿刺，孵育于37℃观察七天。阳性者培养基变红色，阴性者培养基仍为黄色。