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实验——酵母菌的形态观察
2011-4-13 9:37:11 天津农学院精品课程
1目的
1.1 观察啤酒酵母的个体形态及其无性繁殖。
1.2 观察假丝酵母的菌体结构、假菌丝以及繁殖特点。
2 原理
真菌是具有真正细胞核的真核生物,包括酵母菌、霉菌和大型?真菌三大类型。本部分主要介绍如何观察酵母菌的显微形态结构。
酵母菌是单细胞的真核微生物,细胞核和细胞质有明且分化,个体比细菌大得多。酵母菌的形态通常有球状、卵园状、椭圆状、柱状或香肠状等多种。酵母菌的无性繁殖有芽殖、裂殖和产生掷孢子;酵母菌的有性繁殖形成子囊和子囊孢子。酵母菌母细胞在一系列的芽殖后,如果长大的子细胞与母细胞并不分离,就会形成藕节状的假菌丝。
3 材料
3.1器械
接种针、接种环、酒精灯、载玻片、盖玻片、吸管、显微镜、镊子、恒温培养箱。
3.2培养基与染液
配制麦芽汁培养基、肉汤蛋白胨培养基、孔雀绿染液、0.1?美蓝液、           
3.3菌种
啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae),假丝酵母(Candida.spp.)的试管斜面菌种。
4 流程
啤酒酵母镜检→假丝酵母镜检→酵母菌死活细胞镜检→子囊孢子镜检
5 步骤  
5.1 啤酒酵母形态观察
取一洁净载玻片,在载玻片上滴一滴无菌水,用接种环挑取少许啤酒酵母菌苔置于无菌水中,用接种环轻轻划动,使其分散成云雾状薄层;另取一盖玻片,小心覆盖菌液。在显微镜下观察酵母细胞的形状、大小及出芽方式。
5.2 假丝酵母观察
用划线法将假丝酵母接种在麦芽汁平板上,在划线部分加无菌盖玻片,于28—30℃培养3天,取下盖玻片,放到洁净载波片上,在显微镜下观察呈树枝状分枝的假菌丝细胞的形状,或打开皿盖,在显微镜下直接观察。
5.3 酵母菌死活细胞的检查
载片上加一滴0.1%的美蓝,用接种环挑取少许酵母菌苔置于美兰液滴中,用接种环划动,使其分散均匀,加盖玻片,在显微镜下观察,死细胞为兰色,活细胞无色。
5.4 子囊孢子的观察
将啤酒酵母接种于麦芽汁液体培养基中,于28~30℃恒温箱中培养24小时,连续转接培养3~4次;再转接到肉汁蛋白胨培养基中,在25~28℃的恒温箱中培养3天左右,最后经过涂片染色后(按芽孢染色法),观察子囊孢子形状和特点,以及每个子囊内的孢子数等。
6 结果
把观察到的各种酵母绘图,并注明各部分名称。
7 思考
7.1 在酵母菌死活细胞的观察中,使用美兰液有何作用?
7.2 比较假丝酵母与啤酒酵母形态的异同。
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