原理：氰化钾可以抑制某些细菌的呼吸酶系统，细胞色素、细胞色素氧化酶、过氧化氢酶和过氧化物酶，以铁卟啉作为辅基，氰化钾能和铁卟淋结合，使这些酶失去活性，使细菌生长受到抑制。
培养基：
蛋白胨                   10g        
Na2HPO4                 5.64g
NaCl                     5g         
KH2PO4                  0.225g
蒸馏水                   1000ml
此为基础液。调节pH至7.6，15磅灭菌15分钟，冷却，置冰箱。
于冷基础液中加以15ml0.5％氰化钾溶液（0.5g KCN溶于100ml冷却的灭菌蒸馏水中），分装于灭菌小试管，每管约1ml，立即用蘸有热石蜡的软木塞塞紧，可于冰箱中保存2周。
方法：将20～24小时肉汤培养物，接种一大环到KCN培养基中，立即用软木塞塞紧，置37℃培养，连续观察2天，有细菌生长时为阳性反应。注意：KCN为剧毒药，宜在通气橱内操作