原理：细菌产生的脂酶可分解脂肪为游离脂肪酸。加在培养基中的维多利亚蓝可与脂肪结合成为无色化合物，如果脂肪被细菌产生的脂肪酶分解，则维多利亚蓝释出，呈现深蓝色。该试验主要用于厌氧菌的鉴定。
培养基：脂酶培养基
蛋白胨                         10g  
酵母浸膏                       3g   
氯化钠                         5g   
琼脂                           20g  pH7.8
维多利亚蓝（1：1500水溶液）   100ml
玉米油                         50ml
蒸馏水                         900ml
方法：将被检细菌接种于脂酶培养基上，于35～37℃培养24小时。细菌如有脂酶，则使培养基变为深蓝色，否则培养基不变色（无色或粉红色）。