原理：某些细菌能产生尿素酶。尿素酶可分解尿素，产生大量的氨，使培养基的pH值升高。
    培养基：应用Christenrsen氏培养基
蛋白胨               1g      
葡萄糖               1g
氯化钠               5g      
KH2PO4              2g 
0.2％酚红溶液        6ml     
琼脂                 20g
蒸馏水加至           1000ml
调整pH至6.9。需生长因子的细菌，可加入酵母浸膏0.1％。

    121℃高压灭菌15分钟，冷却到55℃时加入十分之一的20％尿素液（经滤过法除菌）使尿素含量为2％（即每1000ml中有20g），制成短斜面。接种细菌时，同时作划线及穿刺，置37℃培养24小时后观察，培养基从黄色变红色时为阳性。接种量多，反应快的细菌，数小时即可使培养基变红。阴性者应继续观察4天。

    可以省去琼脂，将各物（包括20g尿素）溶解后，过滤除菌，无菌分装，培养2日，无菌者应用。