1.菌种   (1)藤黄微球菌(Micrococcus Luteus)[CMCC(B)28001]                
    (2)生孢梭菌(Clostridium sporogenes)[CMCC(B)64941]                     
    (3)白色念珠菌(Candida albicans)[CMCC(F)98001]　　　　　　　　　　　　 
    2.操作 (1)取藤黄微球菌的营养琼脂斜面和白色念珠菌的真菌培养基琼脂斜面的新
鲜培养物,分别用0.9％无菌氯化钠溶液制成均匀的菌悬液；将生孢梭菌不含琼脂的需气
菌、厌气菌培养基新鲜培养物，吸入无菌离心管，离心，弃去上清液,菌体用0.9％无菌
氯化钠溶液制成均匀的菌悬液。分别取上述菌悬液,用0.9％无菌氯化钠溶液稀释至与细
菌浊度标准管相同的浓度, 然后作10倍系列稀释，制成1ml中含10～100个菌并计数。　　　　　　　　　　　　　(2)将藤黄微球菌、生孢梭菌的需气菌、厌气菌培养基新鲜培养物,白色念珠菌的真
菌培养基的新鲜培养物1ml，用0.9％无菌氯化钠溶液作10倍系列稀释,制成1ml中含10～
100个菌并计数。
    将藤黄微球菌的上述(1)或(2)的稀释菌液各1ml，分别接种至每管装量为9ml的需气
菌、厌气菌培养基3管，生孢梭菌的上述(1)或(2)的稀释菌液各1ml，分别接种至每管装
量为12ml的需气菌、厌气菌培养基3管,白色念珠菌的上述(1)或(2)的稀释菌液各1ml,接
种至每管装量为9ml的真菌培养基3管,以未接种的培养基作对照，按规定的温度培养5天
并逐日记录结果。
    3.结果判定    以每株菌接种后的培养基不得少于2管呈现生长，即该培养基的灵敏
度检查符合要求。
    
对照用菌液    
    
    1.金黄色葡萄球菌（Staphylococcus  aureus）菌液  取金黄色葡萄球菌[CMCC(B)
26003]的营养琼脂斜面新鲜培养物1白金耳，接种至营养肉汤培养基内,在30～35℃培养
16～18小时后，用0.9％无菌氯化钠溶液稀释至每1ml中含10～100个菌。
    2.生孢梭菌（Clostridium sporogenes）菌液  取生孢梭菌[CMCC(B)64941]的需气
菌、厌气菌培养基新鲜培养物1白金耳,接种至相同培养基内，在30～35℃培养18～24小
时，用0.9％无菌氯化钠溶液稀释至每1ml中含10～100个菌。
　　3.白色念珠菌（Candida albicans）菌液  取白色念珠菌[CMCC(F)98001]的真菌琼
脂培养基斜面新鲜培养物1白金耳,接种至真菌培养基内，在20～25℃培养24小时后，用
0.9％无菌氯化钠溶液稀释至每1ml中含10～100个菌。
    抑细菌和抑真菌试验
    在用直接接种法无菌检查前，可用如下方法测定供试品是否具有抑细菌和抑真菌作
用。用需气菌、厌气菌培养基4管及真菌培养基2管，分别接种金黄色葡萄球菌、生孢梭
菌、白色念珠菌均10～100个菌各两管，其中1管加供试品规定量，所有培养基管置规定
的温度，培养3～5天。如培养基各管24小时内微生物生长良好，则供试品无抑菌作用。
如加供试品的培养基管与未加供试品的培养基管对照比较，微生物生长微弱、缓慢或不
生长，均判为供试品有抑菌作用。该供试品需用稀释法（种入较大量培养基中）或中和
法、薄膜过滤法处理，消除供试品的抑菌性后，方可接种至培养基。