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EEM培养基原理及实验现象
赵宇
2019-11-14 15:29:09 青岛海博生物

一、试验原理:

胰蛋白胨提供微生物生长所需的营养,磷酸氢二钠和磷酸二氢钾为缓冲剂,维持PH值得稳定,牛胆盐和煌绿抑制革兰氏阳性菌和非肠道菌群的生长,D-甘露醇提供碳源。


二、培养基配方:


胰蛋白胨

10.0

D-甘露醇

牛胆盐

磷酸氢二钠

磷酸二氢钾

5.0

20.0

6.5

2.0

煌绿

0.0135

pH7.2±0.2 25℃


三、试验方法:

1、称取本品45g,加热溶解于1000ml纯化水中,分装于三角锥形瓶或试管中,100℃水浴灭菌30min,迅速在流动的冷水中冷却,无需高压灭菌。

2、将标准储备菌株接种到非选择性肉汤培养过夜或采用其他制备方法,制备成含菌量10-100CFU/mL的菌悬液。

3、在装有待测培养基的试管中接种1 mL目标菌,非目标菌接种100-1000CFU,同时接种两个平行管,置于36℃培养18-24h。


四、试验结果:

接种以下质控菌株,在36±1℃培养18-24小时:

质控菌株

菌株编号

接种量/CFU

试验结果

产气肠杆菌

ATCC13048

10-100

浑浊变黄

大肠埃希氏菌

ATCC25922

10-100

浑浊变黄

鼠伤寒沙门氏菌

ATCC14028

10-100

浑浊变黄

金黄色葡萄球菌

ATCC25923

100-1000

抑制


图1 EEM培养基试验结果

a:大肠埃希氏菌;b:鼠伤寒沙门氏菌;c:产气肠杆菌;d:金黄色葡萄球菌;e:空白对照

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