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尿素酶生化管原理及实验现象
王永兴
2021-8-23 13:55:28 青岛海博生物
一、用途:

用于细菌尿素酶反应。


二、实验原理:

产尿素酶的细菌分解尿素后产氨,pH上升培养基呈碱性,酚红为酸碱指示剂,变色范围为pH6.8-8.4,颜色由黄色变为红色。因此培养基颜色由橙色变为玫红色为尿素酶试验阳性。大多数尿素酶阴性细菌会分解培养基中少量的葡萄糖产酸,使培养基变黄,也有少数尿素酶阴性的细菌不分解葡萄糖,无颜色变化。培养基出现变黄或不变色均为尿素酶阴性反应。


三、培养基配方(g/L):

蛋白胨
1.0
葡萄糖
1.0
氯化钠
5.0
磷酸氢二钾
2.0
20%无菌脲溶液
100mL
酚红
0.012
pH 6.9±0.1 25℃

四、试验方法:

  1、用磨砂轮在安瓿瓶颈部划线一圈,掰开待用。

  2、将标准储备菌株接种到非选择性肉汤中或采用其他制备方法,制备成5 McFarland浊度(约109CFU/ml)的菌悬液。

  3、吸取0.05ml-0.08ml(约1-2滴)菌悬液至生化管中,36±1℃培养24-120h后,观察实验结果。


五、结果观察与解释 :

  接种以下质控菌株,36±1℃培养24-120h:

质控菌株
菌株编号
生长情况
其他特征
单增李斯特氏菌
ATCC19114
+++
阴性,黄色
大肠埃希氏菌
ATCC25922
+++
阴性,黄色
普通变形杆菌
ATCC13315
+++
阳性,玫红色
奇异变形杆菌
ATCC14153
+++
阳性,玫红色
鼠伤寒沙门氏菌
ATCC14028
+++
阴性,黄色


图1-1  尿素酶生化管质控结果

备注:a:单增李斯特氏菌,b:大肠埃希氏菌,c:普通变形杆菌,d:奇异变形杆菌,e:鼠伤寒沙门氏菌,f:空白对照


六、注意事项:

本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。


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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。

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