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配制培养基的容器选择与使用
纪旭艳
2026/10/26 16:23:51 青岛海博生物

在实验室进行各种培养基的配制时,经常会用到不同规格大小的锥形瓶、试管、丝口试剂瓶、烧杯、输液瓶等容器。针对不同培养基的配制方式、体积、灭菌条件等方面,在容器的选择和使用上也会有所不同,合理的选择与使用也是实验成功的关键条件之一。


一、烧杯的使用

烧杯通常仅做为溶解的容器使用,可进行加热,加热时需在酒精灯或电陶炉上方隔石棉网加热。在配制需加热溶解的培养基时,为防止溶液暴沸溢出,装量一般不超过容积的2/3, 烧杯的瓶口较大,通常不能做为培养基灭菌的容器使用,仅做为溶解的中转容器。


二、试管的使用

试管是配制培养基常用的容器之一,液体培养基、斜面培养基、生化鉴定等培养基的配制常用到不同规格的试管,玻璃试管尺寸15*150、18*180、18*150等最常用,大部分试管使用硅胶塞或金属/塑料帽封口,能透气,也有部分试管使用螺旋盖,密闭不透气,玻璃试管可直接高压蒸汽灭菌,若使用塑料试管,通常需先将培养基灭菌后,再无菌分装至一次性无菌塑料试管。

(1) 配制斜面:制备长斜面时,培养基通常占据试管高度的1/3-1/4,摆成斜面后总高度通常不超过试管高度的2/3;制备高层斜面时,培养基通常占据试管高度的1/3-1/2,斜面:底层约为2:3。

(2) 配制液体培养基:装量通常为1/3-1/2,进行厌氧菌培养时选择较细的试管和较高的装量,更容易维持底层的厌氧环境,一般不使用塑料试管。培养需氧菌时更宜选用粗试管,培养基液面低一些,更有利于需氧菌的生长。培养需氧菌通常不使用螺旋盖试管。

(3) 生化试验培养基:生化鉴定宜选用较小的试管,因为小体积的培养基通常可以更快得到生化鉴定结果,一般装量占试管高度的1/5-1/3即可。


三、锥形瓶的使用

锥形瓶是培养基配制最常用的容器之一,下宽上窄的结构适合培养基的摇匀、振荡培养以及倒平板。锥形瓶也同样可以像烧杯一样在酒精灯或电陶炉上隔石棉网进行加热操作。

(1) 高压灭菌:培养基装量最高一般不超过容器容积的80%,特别是含有琼脂的培养基,装量过多不容易摇匀,造成培养基不凝固等问题。若使用的锥形瓶体积在1L以上,建议盛装的培养基不超过50%,避免培养基出现灭菌不彻底或者降温过程暴沸溢出等问题。

(2) 振荡培养:培养基的装量一般在40%-50%,振荡过程中培养基混合较为完全,装量过多容易导致振荡不充分,培养基内部氧气不足,影响微生物的生长。


四、输液瓶的使用

输液瓶与锥形瓶的用途接近,但由于输液瓶通常是密封的胶塞压盖灭菌的,使用上与锥形瓶略有不同。输液瓶一般用来装液体培养基较多(也可以装琼脂培养基,由于本身的形状结构问题,不如锥形瓶好用)。在装量上,输液瓶适合装的更满一些,特别是装厌氧的培养基,输液瓶可以通过充入氮气保护和减少内部空气体积,培养基可以保存更长时间。因使用上的结构问题,输液瓶大多数情况下应用于无菌检查、控制菌检查相关培养基的配制和灭菌。商品化的培养基大多采用输液瓶,主要是因为其密封性和运输的便利性。


五、丝口玻璃瓶的使用

    丝口玻璃瓶俗称蓝盖瓶,在使用上与锥形瓶接近,因其盖子可拧紧密闭,更有利于灭菌后培养基的长期保存(锥形瓶塞通常不密封,保存过程可能出现培养基被氧化、失水、污染等问题)。但须注意,丝口玻璃瓶装入培养基进行灭菌时,盖子通常不直接拧紧,保留透气的效果,进行高压蒸汽灭菌时可保持较好的热穿透效果,灭菌更彻底,且不会出现炸瓶问题,灭菌结束后再将瓶盖拧紧,有利于培养基的长期保持。凝固后的培养基需再次熔化使用时,通常也需将盖子拧松,防止加热过程中炸瓶。


注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。

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