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LBS琼脂的试验方法以及现象
李昊睿
2022-12-12 10:25:24 青岛海博生物

一、试验原理:

  胰酪蛋白胨、牛酵母浸粉提供氮源、维生素、生长因子;葡萄糖提供碳源;磷酸氢二钾为缓冲剂;柠檬酸铁铵、硫酸镁、硫酸锰、硫酸亚铁、吐温-80和乙酸钠为培养各种乳酸菌提供生长因子,吐温80为乳酸杆菌提供所需的代谢脂肪酸;柠檬酸铁铵和乙酸钠能够抑制一些杂菌的生长,包括链球菌、霉菌和除乳酸杆菌外的大多数口腔微生物菌群;加入乙酸,使pH值降低,抑制了其它细菌的生长,有利于乳酸杆菌的分离;琼脂是培养基的凝固剂。


二、用途:

  用于乳酸杆菌的分离培养。


三、培养基配方(g/L):

酵母浸粉

5.0

胰酪蛋白胨

10.0

磷酸二氢钾

6.0

硫酸亚铁

0.034

硫酸镁

0.575

葡萄糖

20.0

乙酸钠

25.0

柠檬酸铵

2.0

硫酸锰

0.12

琼脂

15.0

pH 5.5±0.2   25℃


四、试验方法:

  1.称取本品84.0g,再吸取吐温80 1ml和冰乙酸1.3ml,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,当日使用,无需高压灭菌。次日使用,需118℃高压灭菌15分钟。倾注无菌空平皿备用。

  注:该培养基溶解后有少量沉淀。

  2.制备质控菌液。

  3.选择合适稀释度的目标菌质控菌液0.1ml,均匀涂布于平板上,每一稀释度接种两个平板。

  4.36±1℃培养24-48小时,记录实验结果。


五、结果观察与解释

  接种以下质控菌株,在36±1℃培养24-48小时:

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

参比或计数培养基

方法

质控评定标准

其他特征

嗜酸乳杆菌

CICC6005

20-200

MRS培养基

定量

PR≥0.7

白色突起菌落

植物乳杆菌

ATCC8014

20-200

MRS培养基

定量

PR≥0.7

白色突起菌落


植物乳杆菌ATCC8014
嗜酸乳杆菌CICC6005

植物乳杆菌ATCC8014

白色凸起菌落

嗜酸乳杆菌CICC6005

白色凸起菌落

图1 LBS琼脂微生物质控结果



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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。


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