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亚硫酸铋琼脂(BSA)
2025/3/28 14:42:51 现代微生物培养基和试剂手册

【原理】

  在此培养基中,伤寒杆菌等沙门氏菌生长后由柠檬酸铋与硫酸亚铁反应所产生的亚硫酸铋与煌绿一同皆有选择性抑制大肠菌族及革兰氏阳性细菌生长的作用,而能高度选择性地增进伤寒菌及其它沙门氏菌增殖,故可以接种大量标本中存在的少量病原菌,特别是含硫化物可供细菌产生硫化氢与培养基中的铁盐结合使菌着染呈棕黑色且带有金属光泽易于辨认。故此培养基是具有强抑制性和高度选择性作用。适于在经上述增菌培养基培养后再接种此培养基比其它任何培养基阳性率都高。


【成分】

蛋白胨
10g
牛肉膏
5g
葡萄糖
5g
硫酸亚铁
0.3g
磷酸氢二钠
4g
煌绿
0.025g
柠檬酸铋铵
2g
亚硫酸钠
6g
琼脂
18~20g
蒸馏水
1000ml

【制法】

  (1)将前5种成分溶解于300ml蒸馏水中。

  (2)将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠另加 50ml蒸馏水溶解。

  (3)将琼脂加于600ml蒸馏水中煮沸溶解,冷却至80℃

  (4)将以上三溶液合并,补充蒸馏水至1000ml,调整至pH7.5

  (5)加0.5%煌绿水溶液5ml,随即煮沸不超过1~2分钟,不可用高压蒸锅灭菌。

  (6)将已熔化的培养基趁热轻轻摇匀,使沉淀分散,待冷至50~55℃,立即倾注于平皿中。


【用途】

  亚硫酸铋琼脂最适于检查疑有沙门氏菌的标本,如自来水、污水、食物、乳制品及病人粪便、尿等。也可联合使用其它选择性肠道琼脂培养基。


【注意事项】

  1.标本接种经培养后细菌在本培养基上的生长特性如下:

  (1)伤寒杆菌:培养48小时菌落为黑色呈免眼",出现金属光泽,围绕于菌落周围有黑色带。

  (2)其它沙门氏菌:18小时后出现不同色泽的菌落。如乙型副伤寒菌及肠炎沙门氏菌生长旺盛,菌落也呈黑色,稍湿,类似于伤寒杆菌菌落。甲型副伤寒菌、鼠伤寒菌、猪霍乱菌及摩根氏变形杆菌,在48小时后,可生成稍凸起或平坦的绿色菌落。

  (3)亚利桑那菌的菌落呈黑色,周围培养基一般不变黑或微变黑。有些菌株呈灰绿色带黑心或不带黑心。

  (4)痢疾杆菌属中,除福氏痢疾杆菌和宋内氏痢疾杆菌外,其它都被抑制生长,此两种痢疾杆菌在此培养基上生成褐色隆起的菌落,中心常凹陷像山口样。

  (5)大肠菌族一般全被抑制生长,但偶有少数菌株可以生成黑色、褐色或绿色表面闪光的小菌落,并不出现金属光泽。少数产气杆菌株也可生成隆起粘稠的菌落,出现轻度银色光泽。这类大肠菌族移种培养后,都将生成绿色或褐色菌落,易与伤寒杆菌辨别。

  2.本培养基不需高压蒸汽灭菌。制备过程不宜过分加热,以免降低其选择性。应在临用前当天制备,并随即使用,否则需贮存于潮湿冷暗处,以防干燥。


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