一、检验原理:
原理:胰酪蛋白胨提供氮源、碳源;牛肉浸粉和酵母浸粉提供维生素和生长因子;琼脂是培养基的凝固剂。
四环素检定:本法是利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用,抑菌圈直径与抗生素的浓度或活性有关;比较标准品与供试品两者对接种的试验菌产生抑菌圈的大小,以测定供试品效价的一种微生物学方法。
二、培养基配方(g/L):
胰酪蛋白胨 |
6.0 |
牛肉浸粉 |
1.5 |
酵母浸粉 |
3.0 |
琼脂 |
14.0 |
pH值5.7-5.9(25℃) |
三、试验方法:
1、称取本品24.5g,加热煮沸溶解于1000mL蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌15min,冷却至50℃左右时,倾入无菌平皿中备用。
2、10倍梯度稀释法制备质控菌株菌悬液,吸取适宜梯度的菌悬液接种于培养基和HB0177-8参比TSA培养基。
3、放置于36℃±1℃需氧培养18h-24h,观察试验结果。
四、试验结果判断:
接种以下质控菌株,放置于36℃±1℃需氧培养18h-24h。结果如图1。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
生长情况 |
其他特征 |
蜡样芽孢杆菌 |
CMCC(B) 63303 |
10-100 |
+++ |
生长良好 |
图1 四环素鉴定琼脂的微生物质控结果
五、注意事项:
根据四环素族抗生素残留量的测定相关标准,可搭配本公司现有产品HB0238菌种培养基共同使用。
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