一、产品介绍

  沙门氏菌生化鉴定条和成套生化鉴定管是根据GB4789.4-2016标准制作，用于沙门氏菌的生化鉴定。

  沙门氏菌成套生化鉴定管是由独立的安瓿瓶组装而成，包括赖氨酸脱羧酶试验、靛基质试验、氰化钾试验、尿素酶试验、甘露醇发酵、山梨醇发酵、水杨苷发酵、丙二酸盐、ONPG和卫矛醇共十种生化反应。沙门氏菌鉴定条则是一体化形式，生化反应内容与成套生化鉴定管相同。

  注：需配套Kovacs靛基质试剂盒一起使用。生化鉴定条另需准备无菌液体石蜡。

二、产品的使用方法

  1.使用前准备

  使用前先检查鉴定管或鉴定条的颜色是否正确，有无污染出现。成套生化鉴定管可先做赖氨酸脱羧酶试验、靛基质试验、氰化钾试验和尿素酶试验，根据结果再决定是否需补充其他试验。本产品不含三糖铁琼脂，建议自行准备好三糖铁琼脂同时接种，最终结果判读需结合三糖铁琼脂的反应，必要时还需做血清学进行确认。

  2.接种

  挑取待测菌落至无菌生理盐水中制成约10⁸-10⁹CFU/mL的菌悬液，向生化管或鉴定条中每孔加入50-100μL的菌液（卫矛醇需用接种针挑取菌落穿刺接种），赖氨酸及氨基酸脱羧酶对照管需覆盖液体石蜡约3-5mm厚，将接种后的生化鉴定管置36±1℃培养18-24h。

  3.结果记录

  赖氨酸脱羧酶试验：若赖氨酸脱羧酶生化管为紫色，对照管为黄色，记赖氨酸阳性反应，若均为黄色，则记赖氨酸阴性反应；

  靛基质试验（蛋白胨水）：培养结束后需滴加Kovacs靛基质试剂，若出现玫红色环则记靛基质阳性反应，若为黄色则记靛基质阴性反应；

  尿素酶试验：若培养基变为深红色或玫红色，则记为尿素酶阳性反应，若培养基变黄或颜色不变，则记为尿素酶阴性反应；

  氰化钾试验：若试验管与对照管均浑浊，则记为阳性反应，若试验管澄清而对照管浑浊，则记为阴性反应；

  甘露醇/山梨醇/水杨苷/卫矛醇：若变为黄色则记阴性反应，若不变色或蓝绿色、蓝色则记为阴性反应；

  丙二酸盐：若变为蓝色则记阳性反应，若不变色或黄色记阴性反应；

  ONPG：若变为黄色则记阳性反应，若仍为无色则记阴性反应。

三、结果判读

  按照GB4789.4-2016标准进行判断，可按以下分步进行（沙门氏菌生化分型较多，进行结果判读时并非所有生化都能用得上，例如第一步出现反应4或5，可直接排除沙门氏菌的可能，其他反应不必关注结果）

  （1）三糖铁和赖氨酸反应

  （2）靛基质、尿素酶、氰化钾、赖氨酸、硫化氢（三糖铁底层出现黑色即为硫化氢阳性）

  若出现反应1，则为典型沙门氏菌，结合血清结果报告即可，无需再看其他反应；

  若出现反应2，则可能为靛基质阳性变体沙门氏菌，需再看山梨醇和甘露醇的反应结果，若两者同时为阳性，再做血清学试验进行确证。若山梨醇和甘露醇反应结果不同时为阳性，或者血清学试验不符，则为非沙门氏菌。

  若出现反应3，可能为个别变种的沙门氏菌，直接通过血清学进行确证，若血清学试验不符，则为非沙门氏菌。

  若出现反应4，则可能为甲型副伤寒沙门菌，直接通过血清学进行确证，若血清学试验不符，则为非沙门氏菌。

  若出现反应5，则可能为不产硫化氢的沙门氏菌，需再看ONPG的试验结果，若ONPG为阴性，再进行血清学确证。若ONPG为阳性或血清学不符合，则为非沙门氏菌。

  若出现反应6，可能为氰化钾阳性的沙门菌群，进行下一步生化判读。

  （3）氰化钾阳性沙门氏菌生化反应判读

  若不符合以上反应，则为非沙门氏菌。

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