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一、检验原理：
该培养基用于粪肠球菌的分离培养。
牛肉浸粉和蛋白胨提供微生物生长所需的碳源、氮源、维生素和生长因子；氯化钠维持均衡的渗透压；乳糖为可发酵的糖类；溴甲酚紫为pH指示剂，发酵乳糖产酸的细菌菌落为黄色；琼脂是培养基的凝固剂。
二、培养基配方（g/L）：
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牛肉浸粉 |
3.0 |
|
氯化钠 |
5.0 |
|
蛋白胨 |
10.0 |
|
乳糖 |
20.0 |
|
溴甲酚紫 |
0.06 |
|
琼脂 |
15.0 |
|
pH值7.0±0.1（25℃） |
|
三、试验方法：
1. 称取本品53.1 g，加热煮沸完全溶解于1000 mL蒸馏水中，分装，115℃高压灭菌20 min，倾入无菌平皿，备用。
2. 10倍梯度稀释法制备质控菌株菌悬液，吸取适宜梯度的菌悬液接种于待测培养基和参比培养基（HB0177-8胰蛋白胨大豆琼脂（TSA））。
3. 放置于恒温培养箱36℃需氧培养24 h-48 h，观察试验结果。
四、试验结果判断：
接种以下质控菌株，放置36℃需氧培养24 h-48 h，试验结果如图1所示。
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质控菌株 |
菌株编号 |
接种量（CFU） |
回收率 |
生长情况 |
其他特征 |
|
粪肠球菌 |
ATCC 29212 |
50-250 |
≥70% |
+++ |
黄色菌落，菌落周围变黄 |
|
屎肠球菌 |
ATCC35667 |
50-250 |
≥70% |
+++ |
黄色菌落，菌落周围变黄 |
|
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
50-250 |
≥70% |
+++ |
黄色菌落，菌落周围变黄 |
|
金黄色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
50-250 |
≥70% |
+++ |
黄色菌落，菌落周围变黄 |
图1 质控菌株在含糖牛肉汤琼脂培养基上的生长情况
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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。
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