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RPMI-1640/肝细胞培养基
2025/7/10 14:19:40 现代微生物培养基和试剂手册

【原理】

  用Trager等方法培养恶性疟原虫,其原虫率很少超过10%~15%,新分离株对这一培养系统的适应能力也不一致。Mazier(1984)等报道了用肝细胞作为营养层培养恶性疟原虫,取得了较好的结果。肝细胞能增进原虫生长,可能与肝细胞的特殊功能有关。肝细胞有解毒功能可以清除原虫糖代谢中的乳酸,亦可提供一些原虫生长所需的基本营养物质。

【成分】

RPMI-1640粉
10.4g
HEPES缓冲粉中
5.94g
5℅碳酸氢钠
42ml
人脐带血清
110ml
小鼠肝细胞
若干

【制法】

  用胶原蛋白酶溶液灌注瑞士小鼠肝脏,获得肝细胞,将肝细胞与肝上皮细胞共同孵育于含10%人脐带血清的RPMI-1640液中,再加入虫血,按蜡烛缸方法培养。


【用途】

  用此法培养疟原虫,其繁殖率比对照组提高2倍,此法特别适用于建立新分离株的培养。Mazier等用此法建立全部9个分离株的体外培养,而用常规培养只能建立3株。新分离株在含肝细胞的培养基中生长2~3周后,改用常规培养基均能适应。在用于药敏试验时,由于原虫生长好,可使实验结果更加精确。

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