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一、检验原理：
原理：酵母提取粉和蛋白胨为微生物提供生长所需的氮源和维生素；D-葡萄糖提供碳源；磷酸盐提供缓冲体系；氯化钠维持渗透压；硫酸镁、七水合硫酸亚铁、一水硫酸锰、七水合硫酸锌、五水合硫酸铜和七水合硫酸钴为微生物的生长提供生长因子和微量元素；琼脂是培养基的凝固剂。
二、培养基配方（g/L）：
|
酵母提取粉 |
5.0 |
|
蛋白胨 |
5.0 |
|
D-葡萄糖 |
5.0 |
|
磷酸氢二钾 |
0.5 |
|
磷酸二氢钾 |
0.5 |
|
硫酸镁 |
0.3 |
|
氯化钠 |
0.01 |
|
七水合硫酸亚铁 |
0.018 |
|
一水硫酸锰 |
0.016 |
|
七水合硫酸锌 |
0.0016 |
|
五水合硫酸铜 |
0.0016 |
|
七水合硫酸钴 |
0.0016 |
|
琼脂 |
15.0 |
|
pH值6.3±0.2（25℃） |
|
三、试验方法：
1、称取本品31.35g，加热煮沸溶解于1000mL蒸馏水中，分装，121℃高压灭菌15min，冷却至50℃左右时，倾入无菌平皿中备用。
2、10倍梯度稀释法制备质控菌株菌悬液，吸取适宜梯度的菌悬液接种于培养基和HB0253-88-100沙氏葡萄糖琼脂(SDA)(参比培养基)。
3、放置于25℃±1℃需氧培养72h-120h，观察试验结果。
四、试验结果判断：
接种以下质控菌株，放置于25℃±1℃需氧培养72h-120h。结果如图1。
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质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
回收率 |
方法 |
生长情况 |
其他特征 |
|
白色念珠菌 |
ATCC 10231 |
20-200 |
≥70% |
定量 |
+++ |
白色菌落 |
|
黑曲霉 |
ATCC 16404 |
20-200 |
≥70% |
定量 |
+++ |
白色菌丝 |
图1 葡萄糖酵母提取物琼脂的微生物质控结果
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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。
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