波尔顿选择性肉汤培养基检验原理和使用方法

张辉

2025/7/14 11:32:45 青岛海博生物

一、用途及检验原理：

该培养基用于空肠弯曲菌选择性增菌培养。

动物组织酶解物和乳白蛋白水解物、酵母浸粉提供微生物生长所需的碳源、氮源、维生素和生长因子；氯化钠维持渗透压；α-酮戊二酸提供生长因子，促进空肠弯曲菌的生长；丙酮酸钠和偏亚硫酸氢钠能中和培养基的有毒物质，也能增强菌的耐氧性，有助于未死受损细菌细胞的复苏；碳酸钠提供空肠弯曲菌最有利的pH生长环境；添加剂中，头孢哌酮和多黏菌素B抑制革兰氏阴性菌，万古霉素和三甲氧苄胺嘧啶乳酸盐抑制革兰氏阳性菌，两性霉素B抑制酵母、霉菌的生长；氯化血红素、裂解脱纤维羊或马血可为空肠弯曲菌的生长提供特殊的营养物质。

添加剂：每瓶需配套添加9盒HB0273-2a波尔顿选择性肉汤添加剂使用。

二、培养基配方（g/L）：

动物组织酶解物	10.0
乳白蛋白水解物	5.0
酵母浸粉	5.0
氯化钠	5.0
α-酮戊二酸	1.0
丙酮酸钠	0.5
偏亚硫酸氢钠	0.5
碳酸钠	0.6
氯化血红素	0.01
pH值7.4±0.2（25℃）

三、试验方法：

1. 称取本品27.6g，加热溶解于1000mL蒸馏水中，分装，每瓶225mL，121℃高压灭菌15min，冷至45℃-50℃时，每瓶培养基中加入12.25mL无菌裂解脱纤维羊或马血和1支添加剂，混匀，备用。注：培养基高压灭菌后有一些小黑色颗粒。

2. 10倍梯度稀释法制备质控菌株菌悬液，吸取适宜梯度的菌悬液接种于待测培养基和HBPM0124-15哥伦比亚血琼脂平板、参比培养基（HB0177-8胰蛋白胨大豆琼脂（TSA））。

3. 放置于恒温培养箱42℃±1℃微需氧培养24h-48h，观察试验结果。

四、试验结果判断：

接种以下质控菌株，放置42℃±1℃微需氧培养24h-48h，试验结果如图1所示。

质控菌株	菌株编号	接种量（CFU）	生长情况	其他特征
空肠弯曲杆菌	ATCC 33291	10-100	+++	生长良好
大肠埃希氏菌	ATCC 25922	100-1000	-	抑制
金黄色葡萄球菌	ATCC 6538	100-1000	-	抑制