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RPMI-1640/HYPOX培养基
2025/7/15 14:49:10 现代微生物培养基和试剂手册

【原理】

  Trager Jensen二氏蜡烛缸方法培养疟原虫每天至少需换培养液1次,费人力物力。Reber-Liske将培养基作了改进,加入适量的次黄嘌呤,可延长到3天换液1次。疟原虫营养需要研究表明:腺嘌呤、鸟嘌呤、次黄嘌呤及其核苷等都能支持疟原虫体外生长,但添加次黄嘌呤更能很好地支持原虫生长。


【成分】

RPMI-1640
10.4g
HEPES缓冲粉
5.94g
次黄嘌呤
50mg
双蒸水
960ml
5℅碳酸氢钠
42ml
人血清
110~165ml


【制法】

  同RPMI-1640培养基。


【用途】

  用于恶性疟原虫常规保种培养。隔3天换液,这可保证工作人员周末和假日的休息。培养方法为:将起始原虫率稀释到0.5%以下,红细胞压积降为2.5%,置蜡烛缸内培养,72小时后更换培养液,原虫率由原来的0.5%增加到10%左右,与每天换液相近。培养基中添加次黄嘌呤,这不影响3H-次黄嘌呤掺入实验。只要在用前将原虫放到不含次黄嘌呤的营养液中培养1天,以稀释未标记的次黄嘌令,则3H-次黄嘌呤的摄取就不会受干扰。潘卫庆(1986)将起始培养物的原虫率稀释到0.3%左右,红细胞压积降为2%,亦同样可延长到3天换液1次。原虫率也同于每天换液。


【注意事项】

  1.应注意控制起始原虫率和红细胞压积,过高原虫数可因营养耗尽而使培养中断。

  2.其它同RPMI-1640培养基。

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