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抗白念珠菌荧光抗体
2025/7/18 11:10:17 现代微生物培养基和试剂手册

【原理】

  免疫荧光技术是具有免疫学特性的荧光染色方法,是用荧光素与抗体蛋白质结合制成的荧光抗体,即保留色素的荧光特性,又能保持抗体的免疫学活性。用荧光抗体染色时,由于抗体与相对应的抗原发生特异性反应,在荧光显微镜下,荧光抗体上的荧光色素被激发出强烈的荧光,从而显示出抗原的形态。用此法鉴定真菌比常规培养敏感,快速和特异性高。


【制法】

  制备兔抗白念珠菌荧光抗体,首先制备抗原,以白念珠菌的混悬液(5X107/ml)煮沸灭菌后免疫家兔,然后分离抗血清,提纯IgG,结合荧光素(异硫氰基荧光黄),经鉴定合格后放冰箱备用。


【用途】

  快速检定白色念珠菌*

 

*染色步骤:

1.直接染色法:

  待检物涂片,固定,加兔抗白念珠菌荧光抗体,置湿盒37℃温箱30分钟,用自来水漂洗5分钟,待干镜检。如在荧光显微镜下查见带荧光的念珠菌孢子及菌丝即为阳性。

2.间接荧光抗体染色:

  标本涂片,固定,加兔抗白念珠菌血清,置湿盒内37℃温箱30分钟,用自来水漂洗5分钟待干,加羊抗兔荧光抗体放湿盒3730分钟,漂洗5分钟,待干镜检。

3.荧光菌团法:

  该法比直接染色快速,30分钟可出结果。取待检标本离心后、留下沉淀物加兔抗白念珠菌荧光抗体,离心弃上清,将沉淀物倒于玻片上,荧光显微镜检查,可见带荧光之菌团,高倍镜下可见带荧光的菌体。

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