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改良卵磷脂琼脂培养基的原理和使用方法
段亚可
2025/7/31 9:41:28 青岛海博生物

一、试验原理

  用途:用于化妆品中菌落总数计数。

  原理:蛋白胨、胰酪蛋白胨、牛肉浸粉和酵母浸粉提供细菌生长所需的碳源、氮源、维生素等营养元素;氯化钠维持均衡的渗透压;葡萄糖提供可发酵的碳源;卵磷脂和亚硫酸氢钠能中和防腐剂;琼脂作为凝固剂;吐温80用于中和防腐剂和表面活性剂。


二、培养基配方(g/L)

蛋白胨

10.0

胰酪蛋白胨

10.0

牛肉浸粉

3.0

酵母浸粉

2.0

氯化钠

5.0

葡萄糖

1.0

卵磷脂

1.0

亚硫酸氢钠

0.1

琼脂

20.0

pH值7.0±0.2(25℃)


三、试验方法

  1、称取本品52.1 g,另加入7.0 g吐温80,加热煮沸完全溶解于1000 mL蒸馏水或纯化水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌15 min,倾注无菌平板,备用。

  2、以10倍梯度稀释法制备质控菌株菌悬液,吸取适宜梯度的菌悬液接种于待测培养基和参比培养基(HB0177-8胰蛋白胨大豆琼脂(TSA))。

  3、放置于35℃±2℃恒温培养箱中,需氧培养40 h-48 h,观察试验结果。


四、质控结果

  接种以下质控菌株,放置35℃±2℃需氧培养40 h-48 h,试验结果如图1所示。

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

参比或计数培养基

方法

质控结果

生长情况

金黄色葡萄球菌

ATCC 6538

10-100

TSA

定量

PR≥0.7

+++

大肠埃希氏菌

ATCC 25922

20-200

TSA

定量

PR≥0.7

+++

鼠伤寒沙门氏菌

ATCC 14028

20-200

TSA

定量

PR≥0.7

+++

铜绿假单胞菌

ATCC 27853

20-200

TSA

定量

PR≥0.7

+++


图1 改良卵磷脂琼脂培养基的质控菌株培养结果


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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。

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