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一、产品介绍
用途：本培养基为弱选择性培养基，用于分离肠道致病菌，特别是大肠埃希氏菌。
原理：蛋白胨为细菌生长提供所需的氮源以及其他营养元素；乳糖作为可发酵的碳源；磷酸氢二钾维持缓冲体系；琼脂作为培养基的凝固剂；伊红和美蓝同时作为抑制剂和指示剂，在酸性条件下产生沉淀，形成具黑色中心有金属光泽或无光泽的菌落。伊红为酸性染料，美蓝为碱性染料，细菌分解乳糖产酸时，细菌带正电荷，可以与带负电的酸性染料结合即染上了伊红的颜色；如果细菌因产碱性物质较多，带负电荷时与带正电荷的碱性染料美蓝结合而使得菌落呈蓝色。细菌产酸量较大时，染料可析出结晶形成金属光泽。
二、培养基配方（g/L）
|
蛋白胨 |
10.0 |
|
乳糖 |
10.0 |
|
磷酸氢二钾 |
2.0 |
|
琼脂 |
15.0 |
|
伊红 |
0.4 |
|
美蓝 |
0.065 |
|
pH值7.1±0.2（25℃） |
|
三、试验方法
1、称取本品37.4g，加热溶解于1000 mL纯化水中，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min，冷却至45℃-50℃时，倾入无菌平皿，备用。
2、制备质控菌液接种到伊红美蓝琼脂（EMB）培养基及参比培养基TSA上。
3、放置于36℃±1℃需氧培养18h-24h。
四、结果观察
接种以下质控菌株，放置于36℃±1℃需氧培养18h-24h。培养结果如图1。
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质控菌株 |
菌株编号 |
接种量（CFU） |
参比培养基 |
方法 |
质控结果 |
其他特征 |
|
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
50-250 |
TSA |
定量 |
PR≥0.5 |
黑色菌落，有金属光泽 |
|
大肠埃希氏菌 |
CMCC(B) 44102 |
50-250 |
TSA |
定量 |
PR≥0.5 |
黑色菌落，有金属光泽 |
|
大肠埃希氏菌 |
ATCC 8739 |
50-250 |
TSA |
定量 |
PR≥0.5 |
黑色菌落，有金属光泽 |
|
产气肠杆菌 |
CMCC(B) 45103 |
50-250 |
TSA |
定量 |
PR≥0.5 |
粉红色菌落，无光泽 |
|
鼠伤寒沙门氏菌 |
ATCC 14028 |
/ |
/ |
定性 |
/ |
无色菌落 |
|
金黄色葡萄球菌 |
ATCC 6538 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
/ |
图1 伊红美蓝琼脂（EMB）培养基的微生物质控结果
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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。
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