一、实验原理
用途:用于嗜热需氧芽胞杆菌计数。
原理:胰蛋白胨作为主要的氮源和碳源,同时提供维生素、氨基酸及生长因子。葡萄糖提供易利用的碳源,可作为发酵糖类供微生物能量代谢。可溶淀粉作为碳源的补充。溴甲酚紫作为pH指示剂,在酸性条件下由紫色变为黄色,用于监测培养基pH变化。琼脂作为凝固剂。
二、培养基配方(g/L)
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胰蛋白胨 |
10.0 |
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葡萄糖 |
5.0 |
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可溶淀粉 |
2.0 |
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溴甲酚紫 |
0.04 |
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琼脂 |
15.0 |
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pH值7.0±0.2(25℃) |
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三、试验方法
1. 称取本品32.0g,加热溶解于1000mL蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌15min,备用。
2.10倍梯度稀释法制备质控菌株菌悬液,吸取适宜梯度的菌悬液涂布接种于待测培养基(溴甲酚紫葡萄糖琼脂,HB8784)以及参比培养基(胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)HB0177-8)。
3. 放置于55℃需氧培养24h-48h,观察试验结果。
四、结果观察
按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置于55℃需氧培养24h-48h。培养结果如图1。
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质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
回收率 |
生长情况 |
其它特征 |
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嗜热脂肪芽孢杆菌 |
ATCC 7953 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
黄色菌落 |
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TSA琼脂对照培养基 |
溴甲酚紫葡萄糖琼脂培养基 |
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图1 质控菌株在溴甲酚紫葡萄糖琼脂培养基的生长情况
四、注意事项
培养基中含少量淀粉,若灭菌前未加热溶解,灭菌后可能出现少量白色沉淀。
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